论文部分内容阅读
研究背景系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以产生大量自身抗体、累及多系统脏器、出现免疫复合物沉积为主要特征的结缔组织疾病,同时也是一种系统性的自身免疫性疾病。该疾病不仅会影响血管壁、皮肤等组织,同时还会造成关节、肾脏、血液系统及神经系统的改变。目前认为在不同地区和不同种族间SLE的发病率存在一定的差异,且男女性别间SLE发病率也存在较大差异。SLE患者中90%以上为女性,发病年龄多集中在25~45岁,目前我国女性SLE发病率约为110/10万,严重地影响了育龄期女性的身心健康。SLE的病因和发病机制至今尚未明确,可能是受遗传因素和环境因素的双重影响。瘦素是一种由瘦素基因(leptin gene,LEP)编码产生的蛋白质,参与体内多种免疫炎症过程。瘦素可以通过与瘦素受体结合形成二聚体,激活JAK2/SATA3和mTOR信号通路从而影响免疫系统功能;瘦素也可以促进T细胞增殖,抑制T细胞凋亡,诱导白细胞介素1(interleukin 1,IL-1)、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)等多种细胞因子的表达,同时促进辅助T细胞向Th1细胞转变,从而参与免疫调节过程。近期研究认为瘦素基因、瘦素受体基因(leptin receptor gene,LEPR)多态性及瘦素的表达水平与SLE、类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)等多种自身免疫性疾病的发生、发展存在关联。目前,关于SLE患者体内瘦素表达水平变化与疾病之间的关联研究结果尚有争议,且在中国汉族人群中开展的瘦素和瘦素受体基因多态性与SLE遗传易感性的关联研究非常有限。目的探讨LEP和LEPR基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与中国汉族人群SLE患者遗传易感性间的关联,分析LEP、LEPR基因相关snp与sle患者主要临床表现之间的关联,并比较lep、lepr基因相关snp与sle患者血清瘦素表达水平的联系。方法本课题采用病例对照研究方法,选取sle患者633例,来源于安徽医科大学附属省立医院、安徽医科大学第一附属医院和安庆市立医院三家医院风湿免疫科的门诊或住院患者,病例诊断依据美国风湿病学会1997年修订的sle分类标准。选取健康对照559例,来源于安徽医科大学第一附属医院健康体检中心健康体检者。采用多重高温连接酶检测反应技术(improvedmultipleligasedetectionreaction,imldr)进行基因分型检测,对lep基因4个位点(rs11761556,rs12706832,rs2071045,rs2167270)以及lepr基因9个位点(rs10749754,rs1137100,rs1137101,rs13306519,rs1805094,rs1805096,rs3790434,rs3806318,rs7518632)的单核苷酸多态性进行分析。采用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,elisa)测定sle患者血清瘦素表达水平。结果瘦素及瘦素受体基因的13个多态性位点的基因型频率及等位基因频率在sle患者与健康对照之间的差异均无统计学意义(均有p>0.05),调整性别和年龄后发现leprrs1137100位点基因型频率分布在两组间的差异存在统计学意义(ggvs.aa:χ2=3.904,p=0.048,or=1.948,95%ci:1.005-3.776)。同时,进一步分析了显性模型、隐性模型和相加模型等遗传模型在病例组与对照组之间的分布,两者之间的分布差异也均无统计学意义(均有p>0.05)。调整性别和年龄后发现leprrs1137100位点的隐性模型及相加模型在两组间的差异分布存在统计学意义(ga+ggvs.aa:χ2=4.365,p=0.037,or=0.496,95%ci:0.257-0.958;ggvs.aa:χ2=3.871,p=0.049,or=0.514,95%ci:0.265-0.997)。对基因多态性与临床表现之间的关联分析发现,lep基因rs2071045位点在伴有心包炎的sle患者中,其tt基因型频率及t等位基因频率高于未伴有心包炎的sle患者(χ2=8.811,p=0.012;χ2=6.432,p=0.011)。rs11761556位点等位基因频率与sle患者是否伴随颧部红斑之间存在统计学关联(χ2=4.067,p=0.044)。lepr基因rs3806318位点基因型及等位基因频率分布与sle患者是否伴有光敏感之间具有统计学关联,sle同时伴有光敏感者其gg和ga基因型频率以及G等位基因频率高于SLE未伴有光敏感者(χ2=8.693,P=0.013;χ2=6.948,P=0.008)。同时,该位点基因型频率还与SLE患者中关节炎的发生存在统计学关联(χ2=6.204,P=0.045)。另外,在SLE合并光敏感的患者中,rs1137100位点AA和GA基因型频率及A等位基因频率高于未合并光敏感的患者(χ2=6.272,P=0.043;χ2=5.609,P=0.018)。单倍型分析发现,LEPR基因的9个位点构建的单倍型中,SLE病例组ACGCAGCAA单倍型频率低于对照组(χ2=9.038,P=0.003,OR=0.745,95%CI:0.615-0.903);而ATGCAGCAA单倍型结构在SLE病例组中的频率高于健康对照组(χ2=4.327,P=0.038,OR=1.390,95%CI:1.018-1.897)。SLE患者的瘦素血清表达水平与13个位点单核苷酸多态性之间均无统计学关联(均有P>0.05)。结论瘦素和瘦素受体基因的13个位点SNP与SLE遗传易感性无统计学关联,但调整性别、年龄后发现LEPR rs1137100位点基因型频率在两组中分布存在差异,且SLE患者不同瘦素和瘦素受体基因型下的的血清瘦素表达水平差异无统计学意义,但部分位点SNP可能与该疾病的某些临床表型有关。