利用组织工程的方法,将高浓度的皮肤成纤维细胞种植在聚合物材料上并进行体外培养,可以制备出具有活性的人工皮肤,促进伤口的愈合.我们选用具有低免疫源性、良好的生物相容性及生物可降解性等优良性质的天然产物壳聚糖及其衍生物N-羧丁基壳聚糖为原料,制备了一些海绵材料及其与蛋白质的复合材料,并以这些材料为骨架材料,制备出了具有生物活性的人工皮肤.首先,壳聚糖与乙酰丙酸反应并用NaBH<,4>还原生成的C=N键,制得了N-羧丁基壳聚糖,采用冷冻干燥等方法制备了N-羧丁基壳聚糖的多孔性海绵材料及其与胶原、壳聚糖等物质的复合材料,并对材料的结构和性能进行了表征.接着,从人的低月龄(50~60天)胎儿的流产物中分离出皮肤成纤维细胞,通过体外的传代培养,获得细胞类型95﹪以上单一的皮肤成纤维细胞.将人胚皮肤成纤维细胞分别种植在所制备的各种海绵材料中,并进行体外培养,评价材料对皮肤细胞的生物相容性.组织切片等实验证明,各材料均有良好的细胞相容性,特别是胶原或明胶的加入,使得材料更有利于细胞的贴附生长.最后,在N-羧丁基壳聚糖胶原复合材料上进行了皮肤组织块的培养.通过扫描电镜及组织切片观察发现,皮肤组织块不仅可以材料上贴附生长,而且可以分化出细胞并在材料中生长,细胞在材料中呈球形存在,并通过新产生的细胞间基质与材料相连或相互连接成为整体.材料结构对细胞的贴附生长有很大影响,孔径为10~45微米的材料对细胞生长有利.