背景和目的20世纪后期，癌症治疗的一大进步就是化疗药物的发展和临床应用。这些药物通过损伤细胞DNA或抑制微管功能，进而阻止细胞增殖，导致细胞死亡而发挥抗瘤作用。为了追求最大幅度地杀灭肿瘤细胞，化疗药物的剂量常用至机体的最大耐受剂量(Maximum Tolerated Dose，MTD)。但MTD化疗常引起严重的毒副作用，在机体从化疗损伤中恢复的间歇期内，肿瘤细胞(包括选择性耐药克隆)以及对其有支持作用的间质细胞也得以重新增殖。因此，MTD化疗不仅引起严重的毒副作用，降低肿瘤患者的生活质量，还容易产生耐药性，治疗效果也欠佳。为了避免MTD化疗引起的问题，研究者们开始寻找新的给药方式，旨在提高抗瘤和／或抗转移效果并同时降低毒性。肿瘤血管生成对维持原发肿瘤的生长、浸润和转移至关重要。Judah Folkman于1971年第一次提出针对肿瘤血管生成的靶向治疗策略，此后人们转而开始转而研究化疗药物的抗血管生成作用。实际上，所有类型的化疗药物都是通过损伤分裂细胞的DNA或破坏其微管而发挥抗瘤作用。内皮细胞分裂发生于新生血管形成期间，其也包括于肿瘤血管生成中，同基本处于静止状态的正常血管相比，肿瘤血管内皮细胞处于高度生长状态，对细胞毒性药物更敏感。研究发现，某些细胞毒性药物能够抑制血管生成过程，尤其是在低剂量、高频率给药的情况下。与MTD化疗治疗中伴一较长间歇期(常为2～3周)的给药方式相比，低剂量、高频率或持续给药对肿瘤血管内皮的靶向作用更强，这种类型的化疗方案被称为“节律化疗”或“抗血管生成化疗”。节律化疗以肿瘤血管内基因型稳定、活化的内皮细胞为治疗靶点，可降低耐药性的发生，提高治疗效果，又因其用药量较低还能降低化疗的毒副作用。另外，节律化疗与其它抗血管生成药物联合应用还有协同作用。研究表明，有不少肿瘤的发生、进展和慢性炎症有着密切的关系。炎症反应除了可以引起抗肿瘤反应之外，更多的是促进了肿瘤的增殖、血管生成和转移。炎性血管生成似乎成为了肿瘤生长和扩散的中心力量，这个观点可以通过应用传统的抗炎药物而达到抑制血管生成来得到证实。炎性血管生成的理论提出了新的治疗靶点，通过抗炎治疗来抑制肿瘤血管新生。目前节律化疗联合抗炎治疗的报道国外少见，国内尚未见到相应报道。本课题以荷Lewis肺癌的C57BL／6小鼠为模型，初步探讨常用化疗药物多西他赛(docetaxel)节律化疗及抗炎药物地塞米松(dexamethasone)抑制肿瘤血管生成的作用，同时比较节律化疗与抗炎治疗对肿瘤的控制情况及其毒副反应等。方法建立C57BL／6小鼠荷Lewis肺癌模型后，随机分为以下四组：①多西他赛节律组。腹腔注射docetaxel 5mg／kg，隔d一次；②地塞米松组。腹腔注射dexamethasone 5mg／kg，每d一次；③联合组。腹腔注射docetaxel 5mg／kg，隔d一次，dexamethasone5mg／kg，每d一次；④对照组。腹腔注射生理盐水0.2mL，每d一次。每组10只小鼠。以上各组均于接种后第6d(皮下肿瘤约100～200mm~3)起开始给药，持续给药8d。每日观察小鼠饮食、活动及一般状况。接种后第15d全部断颈处死小鼠。实验过程中，连续测量小鼠肿瘤体积和体重，分别绘制肿瘤生长曲线和小鼠体重变化曲线，观察各组的抑瘤效果及毒副作用。处死小鼠后称瘤重，用免疫组化方法测定各组肿瘤组织的微血管密度(MVD)及缺氧诱导因子1-a(HIF-a)、核转录因子-κB(NF-κB)的表达情况，并进行常规组织学观察。实验数据应用统计软件SPSS10.0进行统计学处理，各组MVD比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验；各组HIF-1a、NF-κB的表达率比较采用非参数检验Mann-Whitney两独立样本比较法，以a=0.05作为检验水准。结果1．多西他赛节律组、地塞米松组和联合组肿瘤生长曲线较平缓，对照组肿瘤生长曲线较陡直。2．多西他赛节律组、地塞米松组和联合组小鼠未出现明显体重下降，体重于平稳状态中缓慢上升；对照组小鼠体重逐渐增加，增长幅度较快。实验结束时，多西他赛节律组、地塞米松组、联合组和对照组的平均瘤重分别为(2.85±0.30)g、(2.80±0.31)g、(2.46±0.21)g、(4.25±0.42)g。3．肉眼观察大体标本，对照组肿瘤假膜不完整，瘤组织颜色红润、质脆；多西他赛节律组、地塞米松组、联合组瘤块假膜完整，瘤组织颜色苍白、质韧；光镜下观察组织学(HE染色)，对照组呈现灰红色，血管丰富，中心坏死；多西他赛节律组、地塞米松组、联合组瘤组织中心及边缘常见灶状或大片状坏死，血管明显减少。4．多西他赛节律组、地塞米松组、联合组和对照组的MVD分别为(15.89±2.28)、(15.90±1.92)、(12.44±1.72)和(27.10±2.06)。多西他赛节律组、地塞米松组和联合组的MVD比对照组显著下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。5．多西他赛节律组、地塞米松组和联合组的HIF-1a在肿瘤组织中的表达较对照组显著下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。6．多西他赛节律组、地塞米松组和联合组的NF-κB在肿瘤组织中的表达较对照组显著下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论1．多西他赛节律化疗和地塞米松均能有效抑制Lewis肺癌生长和血管生成。2．多西他赛节律化疗联合地塞米松可以协同抑制Lewis肺癌生长和血管生成，其作用优于单药组。3．多西他赛节律化疗和地塞米松可通过抑制HIF-1a及NF-κB的表达，从而抑制Lewis肺癌的生长和血管生成。