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禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)可感染多种家禽及鸟类,是危害养禽业的主要疾病之一。尤其是H9N2亚型禽流感病毒在世界范围内均有分布,严重影响了我国及世界养禽业的发展,并且该病毒可直接感染人类,公共卫生意义重大。疫苗免疫可有效预防和控制H9N2亚型禽流感病毒的感染,在我国禽流感防控中发挥了重大作用。本研究为掌握中国华东地区H9N2亚型禽流感病毒的变异方向,选取了2008~2013年我国华东地区分离的45株病毒,进行了HA基因序列分析。结果表明,分离株的HA基因都属于A/DK/HK/Y280/97-like分支亚系,与现有疫苗株的亲缘关系相距较远。研究表明,A/DK/HK/Y280/97-like亚系的毒株已在中国华东地区形成流行优势。另外,阳性血清交叉血凝抑制试验及HA1氨基酸位点变化分析结果表明,当前流行的H9N2亚型禽流感病毒在抗原性上已发生了较显著的变化,导致现有疫苗的保护效果正在下降,有必要筛选新的疫苗毒株。本研究为筛选出具有良好免疫原性的H9N2亚型禽流感病毒毒株,选择了2012~2013年中国华东地区分离的6株H9N2亚型禽流感代表流行株进行鉴定并制备灭活疫苗,进行疫苗免疫原性研究。研究表明,6株病毒中JS04株灭活疫苗免疫肉鸡,能抵御国内流行的H9N2亚型禽流感病毒的攻击,可作为新的H9N2亚型禽流感疫苗候选毒株。本研究为评价不同白油用于H9N2亚型禽流感灭活疫苗佐剂的免疫效果,分别对法国进口白油(MARCOL52)和国产3种白油在安全性、乳化性、粘度以及稳定性急性测试,从中选出性能好的白油分别进行疫苗乳化,同时制好的疫苗产品与市场上某种品牌的同类疫苗在同一条件下进行免疫效果的比较试验。研究表明,4种白油上述性能均能达到国家医用白油的技术标准;用进口白油佐剂(MARCOL52)制备的H9N2亚型禽流感灭活疫苗免疫肉鸡,在免疫持续期和抗体效价上进口白油制备的疫苗产品均优于其他3种白油制备的H9N2亚型禽流感灭活疫苗和某种品牌的同类疫苗。