甲胺磷降解菌株的筛选及降解性能研究

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甲胺磷是有机磷农药种类中的一种,目前在我国有着广泛而大量的使用。甲胺磷的杀虫机理是抑制害虫体内的胆碱脂酶活性,以达到消灭或抑制病虫的目的,广泛用于防治水稻、棉花、玉米等农作物害虫。同时,该农药对人畜毒性强,具有胃毒,触杀和内吸作用,是环境污染比较严重的农药品种之一。本研究运用共代谢作用原理分离筛选能高效降解甲胺磷的微生物菌株,研究了菌株的降解甲胺磷的特征,优化菌株协同降解甲胺磷的优化条件。论文取得了以下研究结果。1、运用共代谢基质梯度驯化并分离筛选到能高效降解甲胺磷的微生物菌株W和Y,经常规鉴定及16srDNA鉴定表明二菌株分别为Pseudomonas sp.和Flavobacterium,两株菌间生长有良好生态相融性。2、借助Mintab统计软件运用Plackett-Burman和Box-Behnken中心组合设计优化了降解甲胺磷的辅助基质组成。结果表明实验条件下在基础培养基中添加Na2HPO43.25g/L,NH4C10.9g/L,MgSO4.7H2O0.045g/L,菌株可以在40h使300mg/L甲胺磷降解率提高到87%,比优化前(81%)提高了6%。3、虽然W和Y菌株的甲胺磷降解曲线规律相似,但是W菌株在含有甲胺磷培养基上的生长能力和降解明显强于Y菌株。W、Y菌株降解甲胺磷农药的最适条件为甲胺磷浓度300mg/L,温度为30℃,pH7.0-7.5,转速为180r/m。而Y菌株生长比较滞后,降解速度也较为迟缓,但在700mg/L高浓度甲胺磷中有较高的去除效果。两菌株在300mg/L甲胺磷pH7.0-7.5时40h残留率分别可以达到8.5%和11.3%。低装液量(50-75mL/250mL)时Y菌株降解效果(残留率4.75%-5.238%)高于W菌株(残留率6.54%-7.45%)。4、外加蔗糖、葡萄糖、甘油、麦芽糖和半乳糖对甲胺磷降解有一定效果,但甘露糖对结果会产生不好的影响,精氨酸和尿素作为辅助氮源的添加会延长甲胺磷降解时期。硝酸钾、硫酸铵、酪蛋白和蛋白胨作为辅助氮源的添加会使500mg/L甲胺磷残留率降低到6.87%-10.42%。5、菌群组合中菌株W对结果影响显著,接种按照W菌株比Y菌株为1:0.8时降解300mg/L的甲胺磷效果最好。混合菌株在32℃时40h甲胺磷残留率为11.5%,外加小于2%低浓度氯化钠时甲胺磷残留率能低于4.67%。混合菌株在700mg/L的甲胺磷环境中仍有一定的甲胺磷去除效果,说明菌群组合能提高降解甲胺磷效率。6、氯过氧化物酶(CPO)对甲胺磷具有一定的转化能力,不同浓度的甲胺磷4h内的残留率为74.77-83.9%之间。但是,在低浓度甲胺磷的降解率并不高,而较高浓度时转化率也不高,而在100-150mg/L时残留率能达到74.77%,最适的CPO浓度以2400U/mL为宜。pH6.5为CPO转化甲胺磷的最适值。外加氧化剂不能提高甲胺磷的转化,微量添加氯离子对甲胺磷转化具有微小的促进作用。说明利用氯过氧化物酶可以有效去除废水中的甲胺磷含量,反应的最佳甲胺磷浓度为100-150mg/L,最适加酶量为2400U/L,最适pH值为6.5,H2O2和氯离子的添加对甲胺磷转化应没有特别促进的作用,过量时反而对甲胺磷的转化产生不利的影响。论文研究的结果对因甲胺磷污染而引起的环境破坏的修复探索了一条氧化酶加复合菌的生物降解路线,具有良好的生态效应。
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