论文部分内容阅读
目的1、观察8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）和超氧化物歧化酶（SOD）在糖尿病大鼠肾脏病变时的表达情况。2、探讨西格列汀对糖尿病大鼠肾脏8-OHdG和SOD表达的影响。方法选用清洁级雄性SD大鼠65只，随机分为对照组（NC组，n=15）和造模组（n=50）。对照组予普通大鼠饲料喂养，造模组予高糖高脂饲料喂养4周，测量体重(BW)、空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)。造模组使用STZ30mg/kg腹腔注射，对照组注射等计量的缓冲液。72小时后连续3次测随机血糖≥16.7mmol/L者确定为糖尿病大鼠（3只死亡，1只造模不成功）。将造模成功的大鼠随机分为糖尿病未干预组（DM组，n=16），西格列汀1mg/(kg·d)干预组(Sita1组，n=15），西格列汀10mg/(kg·d)干预组(Sita2组，n=15）。DM组和NC组分别给予等量生理盐水灌胃，NC组继续予普通饲料喂养，余三组予高脂饲料喂养。于第14周末测体重，收集各组大鼠24小时尿液测尿蛋白和8-OHdG，心尖部取血测FBG、FINS、肾功能和SOD。肾组织石蜡切片，HE染色观察肾组织病理形态学改变，免疫组化法观察8-OHdG、SOD的表达。结果1、4周后，大鼠体重及血生化的比较：造模型组大鼠体重、血糖、空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数比正常组增高（P <0.05）2、14周后，四组大鼠体重、空腹血糖和空腹胰岛素的水平比较：与NC组比较，DM组、Sita1组及Sita2组BW明显下降(P <0.05)，Sita1组、Sita2组及DM组三组之间BW无明显差异（P>0.05）。与NC组比较，DM组、Sita1组及Sita2组FBG均明显升高，FINS明显下降(P <0.05)，Sita2组较Sita1组及DM组，FBG下降，FINS升高，差异有统计学意义(P <0.05)，而DM组与Sita1组之间FBG和FINS差异无统计学意义（P>0.05）。3、四组大鼠尿素氮、血肌酐和24h尿蛋白水平比较：与NC组比较, DM、Sita1组及Sita2组BUN、SCr、24h尿蛋白升高（P <0.05），与DM组相比，Sita1组及Sita2组BUN、SCr、24h尿蛋白降低（P <0.05），Sita2组较Sita1组降低，差异有统计学意义（P <0.05）。4、四组大鼠24h尿8-OHdG表达和血清SOD活性水平比较：与NC组比较，DM组、Sita1组及Sita2组24h尿8-OHdG明显升高，血清SOD活性明显降低(P<0.05)，与DM组相比，Sita1组及Sita2组24h尿8-OHdG明显降低，血清SOD活性明显升高(P <0.05)，Sita2组较Sita1组差异有统计学意义（P <0.05）。5、四组大鼠HE染色切片光镜下观察：NC组大鼠肾小球结构未见明显异常；DM组大鼠肾小球体积明显增大充血，球囊腔变窄粘连，肾小球基膜增厚，系膜基质增生明显，肾小管管壁增厚，管腔狭窄。Sita1组和Sita2组有不同程度的减轻，Sita2组减轻更明显。6、四组大鼠免疫组化检测肾组织8-OHdG和SOD表达水平比较：与NC组相比，DM组、Sita1组和Sita2组大鼠肾组织的8-OHdG表达水平明显升高，SOD表达水平明显降低（P <0.05）；与DM组相比，Sita1组和Sita2组大鼠肾组织的8-OHdG表达水平明显降低，SOD表达水平明显升高（P <0.05）；与Sita1组相比较，Sita2组大鼠肾组织的表达变化更明显P <0.05)。结论1、糖尿病大鼠尿液和肾组织中的8-OHdG表达增加，血清SOD活性和肾组织SOD表达减少，提示氧化应激参与糖尿病肾脏病变的发生发展。2、西格列汀可下调糖尿病大鼠肾组织8-OHdG的表达，上调SOD的表达，对糖尿病大鼠肾脏有一定的保护作用。