第一部分、CNP及其特异性受体NPR-B在大鼠睾丸组织的表达　　目的：检测CNP及其特异性受体NPR-B在大鼠睾丸组织的表达。　　方法：采用免疫组织化学法检测CNP及其受体NPR-B在大鼠睾丸组织的表达及定位，然后运用Western Blot方法分析正常成年大鼠睾丸组织、睾丸支持细胞和间质细胞NPR-B蛋白的表达水平。　　结果：免疫组织化学结果显示，CNP主要表达于大鼠睾丸生精细胞（主要是精母细胞）及间质细胞，而其受体NPR-B主要定位于生精上皮的支持细胞及血管内皮细胞。Western blot结果表明睾丸支持细胞和间质细胞均表达CNP的特异性受体NPR-B，且支持细胞表达水平明显高于间质细胞，其差异具有明显统计学意义(P﹤0.01)。　　结论：大鼠睾丸组织CNP主要表达于间质细胞和生精细胞（主要是精母细胞），而其受体NPR-B主要表达于支持细胞及血管内皮细胞。　　第二部分、CNP调控睾丸支持细胞功能的信号转导通路　　目的：探讨CNP调控大鼠睾丸支持细胞功能的信号转导通路。　　方法：体外分离纯化并培养大鼠睾丸支持细胞，培养第3天，给予不同浓度　　CNP(1×10-6mol/L、1×10-7mol/L)处理细胞2h，运用ELISA法检测支持细胞中第二信使环磷酸鸟苷(cGMP)含量变化。然后分别使用CNP、cGMP类似物(8-Br-cGMP)和cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)抑制剂KT5823孵育细胞，观察cGMP/PKG信号在CNP促进支持细胞ABP和TRF基因表达中的作用，实验分为四组：CNP处理组(1×10-6mol/L CNP)、8-Br-cGMP处理组(1×10-4mol/L8-Br-cGMP)、CNP＋KT5823处理组(1×10-6mol/L CNP+1×10-6mol/L KT5823)和空白对照组(支持细胞培养液)，处理细胞2h后，采用RT-PCR法检测支持细胞中ABP和TRF mRNA的表达。　　结果：两种不同浓度CNP均可增加支持细胞内cGMP的含量(P﹤0.05)。与空白对照组相比，CNP能显著促进支持细胞中ABP和TRF mRNA的表达，差异具有明显统计学意义(P﹤0.01)。单独给予8-Br-cGMP即可显著刺激支持细胞ABP和TRF mRNA的表达，其差异具有明显统计学意义(P﹤0.01)。与CNP处理组相比，加入KT5823处理后可明显阻断CNP对支持细胞ABP和TRF基因表达的刺激作用，其差异具有明显统计学意义(P﹤0.01)。　　结论：CNP可以促进大鼠睾丸支持细胞中ABP和TRF的基因表达，其信号通路是通过增加细胞内cGMP含量，并激活其下游信号分子PKG的活性，进而调控睾丸支持细胞功能。