建兰为兰科兰属的地生兰,因其具有优雅的花型和诱人的芳香而备受人们喜爱。前期研究表明,建兰释放花香的主要部位为萼片和侧花瓣,主要的香气物质为茉莉酸甲酯（MeJA）,在自然状态下,Me JA的释放具有明显的昼夜节律性,昼高夜低。为了了解建兰花香Me JA昼夜节律性释放的分子机理,本研究利用建兰的释香部位构建了一个转录组测序文库,进行高通量测序,获得大量的转录本信息,并对建兰转录组进行分析和挖掘,克隆了MeJA合成和昼夜节律钟途径的相关基因,同时进行了生物信息学、亚细胞定位、基因表达特性等方面的研究,还探讨了光组成型形态建成1（CeCOP1）和CeMYC2的蛋白互作及其与茉莉酸合成的关系,获得的主要结果如下:1、建兰花香Me JA的释放在人工控制的光周期内（12 h光照/12 h黑暗）具有明显的昼夜节律。将处于正常光周期的建兰开花植株转移到持续黑暗的条件下,建兰花香成分MeJA停止释放;而转入连续光照的条件下,MeJA在各个测量时间点都有释放,也具有节律性,但节律的相位和振幅均发生了变化。用蓝光对经过48 h黑暗处理的建兰花朵进行照射,结果表明蓝光能显著诱导建兰花香MeJA的释放,释放量先升高后降低,在处理后6 h释放量最大。2、利用RNA-Seq技术和生物信息学的方法,对建兰的转录组信息进行系统的分析、归类和总结;结合建兰花香释放的特点,对茉莉酸甲酯生物合成和昼夜节律钟相关基因进行分析和挖掘,共鉴定了18个与茉莉酸甲酯生物合成有关的基因以及66个昼夜节律钟相关基因。3、采用Hi-TAIL PCR和染色体步移法,分离获得了建兰MeJA生物合成途径关键结构基因CeLOX、CeAOC、CeJMT的5’上游序列,预测结果表明三个序列均具备启动子的特征,并且都具有较多的光响应、激素诱导、逆境应答等顺式作用元件。4、克隆获得了CeCCA1、CeLHY、CePRRs（CePRR1/CeTOC1、CePRR73、CePRR59、CePRR95）、CeGI、Ce ELF3共8个昼夜节律钟相关基因,生物信息学分析表明,这些基因与数据库中其它物种已知的昼夜节律钟基因具有很高的同源性,系统进化分析显示其与单子叶植物的同源基因聚类在一起。5、选取CeLHY、CeTOC1、CePRR73、CeGI、CeELF3等5个有代表性的昼夜节律钟相关基因进行进一步的研究。亚细胞定位结果表明5个节律钟相关基因编码的蛋白均定位于细胞核。基因表达分析表明,正常光周期内,5个基因在花朵释香部位的表达均表现出明显的昼夜节律,其中CeLHY、CePRR73、CeGI的表达高峰在白天,与花香MeJA合成途径关键基因的表达规律相似,而CeTOC1和CeELF3的表达高峰在夜晚,与花香功能基因的表达规律相反;昼夜节律钟CeGI基因可受蓝光诱导表达,表达量先升高后降低,并且与蓝光诱导的MeJA释放和生物合成相关基因表达的规律相一致,具有协同性。CeLHY、CeTOC1、CePRR73和CeELF3均在花器官中的表达量较高,而在非花器官中的表达量较低,CeGI在植株的各个组织器官中均表达,不同组织之间的表达差异不显著。6、克隆获得了CeCOP1和CeMYC2基因,亚细胞定位结果表明CeCOP1和CeMYC2都定位于细胞核。CeMYC2和Ce COP1可以在酵母和洋葱表皮细胞内发生互作,酵母单杂交试验表明,CeMYC2可以和MeJA生物合成途径的CeAOC基因启动子区的G-box结合。在表达特性上,CeCOP1和CeMYC2均受蓝光诱导表达,表达量先升高后降低,CeCOP1的表达量在各个阶段都高于对照的表达量,而CeMYC2的表达量在各个阶段都低于对照;CeCOP1在花萼中表达量最高,而CeMYC2在假鳞茎中表达量最高。综上所述,所获得的结果为下一步开展建兰花香的转录调控研究奠定了基础。