【摘 要】
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目的:通过气相色谱-质谱联用技术（Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）的代谢组学（metabolomics）方法,寻找冠心病血瘀证各亚型之间的差异代谢产物,运用生物信息学分析方法寻找各亚型单独的代谢通路及组间交叉代谢通路,进一步阐明冠心病血瘀证的证候本质。方法:1、筛选符合标准冠心病血瘀证患者、非血瘀证组患者、健康组,静脉采集入选者血液,分离并采集
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（编号81202647）
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目的:通过气相色谱-质谱联用技术（Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）的代谢组学（metabolomics）方法,寻找冠心病血瘀证各亚型之间的差异代谢产物,运用生物信息学分析方法寻找各亚型单独的代谢通路及组间交叉代谢通路,进一步阐明冠心病血瘀证的证候本质。方法:1、筛选符合标准冠心病血瘀证患者、非血瘀证组患者、健康组,静脉采集入选者血液,分离并采集血浆备用;2、将备用的血浆样本预处理后,运用GC-MS技术上机检测得到原始数据,根据GC-MS总离子流图中各峰的保留时间挑选峰值,获取各峰与内标峰的峰面积数据,用相对峰面积（各峰与内标峰的比值）表示代谢物的含量,再对原始数据进行总面积归一化处理;3、使用主成分分析（Principal Component Analysis,PCA）进行无监督的数据分析,用偏最小二乘判别分析（Partial Least Squares-Discriminant Analysis,PLS-DA）进行有监督的数据分析（应用SIMCA14.1软件）,从整体上把握模型的准确性和组间的差异;最后用PLS-DA第一主成分的变量重要性（VIP>1.2）对差异变量进行筛选,比较各亚型之间的差异性代谢产物;4、信号通路分析采用KEGG,代谢产物路径可视化采用met PA网络软件。结果:1、通过GS-MS检测分析,分离鉴定出人体血浆内源性代谢物共70种;2、对冠心病血瘀证三组代谢产物及代谢通路进行两两组间比较发现:在病情由轻转中时,丙酸酯代谢、半乳糖代谢明显活跃,乳糖及蔗糖含量上升;在病情由中转重时,精氨酸和脯氨酸代谢明显活跃,尿素含量上升。结论:冠心病血瘀证轻、中、重三型存在共同代谢产物,但各亚型中仍存在不同差异代谢产物的上调及下调,在不同亚型中存在不同主要的代谢通路,组间存在交叉代谢通路,证明冠心病血瘀证各亚型在病情由轻转中再转重为逐次连续过程。通过差异代谢产物的变化及不同代谢通路可初步区分冠心病血瘀证病情轻重不同的各个亚型,可便于个体化治疗。
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