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【目的】阐明adipophilin在LPS诱导炎症反应过程中的作用,探讨adipophilin与M1型巨噬细胞的关系。【方法】首先,观察adipophilin在LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞中表达变化情况,用Western blot检测细胞内adipophilin、iNOS和Arg-1的蛋白含量,ELISA检测细胞上清液中促炎因子TNF-α、MCP-1、IL-6的分泌情况;然后,分别用ERK1/2特异性抑制剂PD98059和PPARγ特异性抑制剂T0070907预处理RAW264.7细胞6小时后,用100ng/ml的LPS处理细胞12小时,Western Blot检测细胞内adipophilin、iNOS、PPARγ和ERK1/2蛋白含量,ELISA检测上清液中TNF-α、MCP-1、IL-6变化情况;最后,利用逆转录病毒载体转染技术,构建稳定沉默adipophilin的RAW264.7细胞,加入处理因素LPS后,用上述方法检测相关蛋白表达和炎症因子分泌情况。【结果】当用不同浓度LPS处理RAW264.7巨噬细胞12小时,adipophilin蛋白表达呈浓度依赖性的增高,筛选出细胞处理浓度100ng/ml;LPS处理RAW264.7巨噬细胞不同时间后adipophilin蛋白含量先增加后降低,且在12小时达到最高值,同时,炎症因子TNF-α、MCP-1、IL-6的浓度变化情况与adipophilin变化一致,也是先增加后下降,在12小时时达到最高值;当用ERK1/2特异性抑制剂PD98059处理细胞后,与对照组相比,处理组中adipophilin、PPARγ蛋白表达和炎症因子TNF-α、MCP-1、IL-6的浓度都明显减少;而用PPARγ特异性抑制剂T0070907处理细胞后,与对照组相比,ERK1/2活性并无明显变化,但adipophilin蛋白表达和炎症因子TNF-α、MCP-1、IL-6的浓度都显著增加;将LPS加入沉默adipophilin细胞中时,与对照组相比,ERK1/2活性和PPARγ蛋白表达都无明显变化,然而炎症因子TNF-α、MCP-1、IL-6浓度却明显降低。此外,在整个实验过程中,检测到adipophilin与M1型巨噬细胞标志物iNOS和TNF-α的变化情况几乎一致,但在加入ERK1/2抑制剂时iNOS并无明显变化,提示adipophilin与M1型巨噬细胞关系密切。【结论】LPS通过ERK1/2-PPARγ途径上调adipophilin表达,进而促进巨噬细胞内炎症因子TNF-α、MCP-1、IL-6的分泌。