论文部分内容阅读
本论文通过等温滴定量热、荧光光谱等方法研究了牛血清白蛋白(BSA)与6种阳离子表面活性剂：N-十二烷基N(2-羟乙基)-N,N-二甲基溴化铵(DHDAB)、N-十二烷基-N,N-二(2-羟乙基)-N-甲基溴化铵(DDHAB)、N-十四烷基-N-(2-羟乙基)-N,N-二甲基溴化铵(THDAB)、N-十四烷基-N,N-二(2-羟乙基)-N-甲基溴化铵(TDHAB)、N-十六烷基N(2-羟乙基)-N,N-二甲基溴化铵(CHDAB)和N-十六烷基-N,N-二(2-羟乙基)-N-甲基溴化铵(CDHAB)的相互作用。采用等温滴定量热法(ITC)测定了DHDAB、DDHAB、THDAB、TDHAB、CHDAB、CDHAB和DTAB(N-十二烷基-N,N,N-三甲基溴化铵)等表面活性剂在Tris-HCl缓冲溶液中的临界胶束浓度(CMC),以及表面活性剂与BSA的相互作用焓,详细考察了温度、盐含量和表面活性剂亲水头基等对相互作用焓的影响。实验结果表明,BSA与DDHAB的相互作用焓随表面活性剂浓度改变,在CMC前后两个区域出现双峰,随着温度的升高,第一个吸热峰位置几乎不变,而第二个峰则从放热峰逐渐转变为吸热峰；盐浓度增加导致CMC减小,第一个吸热峰峰值变大,第二个吸热峰峰值位置向表面活性剂浓度低的方向移动；随着季铵盐表面活性剂N上羟乙基数目的增加,第一个吸热峰峰值略有减小,第二个吸热峰峰值增大并向表面活性剂浓度低的方向移动。这些现象表明,疏水作用易受温度影响,而盐浓度的改变对于静电作用有着不同影响,适当的盐浓度既可降低头基间的静电斥力,又可增强静电引力。在实验浓度范围内,BSA与THDAB、TDHAB、CHDAB、CDHAB、CTAB(N-十六烷基-N,N,N-三甲基溴化铵)的相互作用焓随表面活性剂浓度改变的曲线出现双峰或三峰,这主要是由于表面活性剂CMC不同,使得静电作用、去水化作用、疏水作用和表面活性剂胶束化等作用程度不同,从而呈现出不同的峰形。采用荧光光谱法考察了表面活性剂碳链长度和亲水头基对荧光强度比值(I0/I)的影响,利用Stern-Volmer方程讨论了低浓度区表面活性剂对BSA的荧光猝灭机理,通过同步荧光光谱考察体系微环境的变化。从荧光光谱可以看出,BSA的荧光强度均随表面活性剂浓度增加出现减小的趋势,并伴随着荧光峰位的蓝移；I0/I值随着烷基碳链增长而显著增大,随着取代羟乙基的数目增加而略微增加。动态猝灭常数(Ksv)值随着烷基碳链增长、温度的升高和羟乙基数目的增多而增大,表面活性剂与BSA的作用增强,且以动态猝灭为主；焓变(AH),熵变(AS)均大于0,说明表面活性剂与BSA的相互作用以疏水作用力为主。BSA同步荧光光谱实验表明,表面活性剂主要与BSA中的色氨酸(Trp)残基发生相互作用,并且表面活性剂能导致BSA构象发生变化。