该文介绍了作者关于光漂白机理和荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)效率实时测量两个方面的理论和实验研究成果.提出了一种全新的D-O和D-P光漂白(Photobleaching)理论模型.详细分析了单个D-O和D-P光漂白事件的作用方式,并在此基础上分别给出了单光子激发和多光子激发条件下,光漂白速率与荧光基团分子处于激发态的几率或者激发光强度间的定量依赖关系.提出了一种在活体细胞内测量光漂白速率与激发光强度之间依赖关系的方法.该方法对离体样品的实验结果表明:单光子激发时的光漂白速率与激发光强度成线性关系,双光子激发时的光漂白速率与激发光的强度成高次非线性关系,而不是期望的平方关系.研究了单个RhB分子的双光子激发光漂白寿命与激发光强度间的依赖关系.针对供体受体之间浓度比一定的情况,提出了一种双通道实时监测FRET效率的方法.FRET效应的双通道实时监测方法只需一次测量就可以获得FRET效率.提出了一种通过测量供体受体联合发射光谱拟合FRET效率的方法.事实上不需扫描获得整个发射谱,而只需扫描获得供体和受体发射峰值附近的发射光谱即可通过该方法拟合得到FRET效率.