纯化雄黄对雄性小鼠生育的影响及抗肿瘤作用的实验研究

来源 :河南科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:paokahh
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目的:研究纯化雄黄对雄性小鼠生育的影响及抗肿瘤作用。 方法:1. 将雄性小鼠100只随机分为对照组(生理盐水),阳性对照组(环磷酰胺),纯化雄黄高剂量组,中剂量组,低剂量组。按组别灌胃给予不同药物,连续给药8周,给药第49日,与雌鼠1:1合笼,第56日给药后,用颈椎脱臼法处死雄性小鼠,解剖取左侧附睾称重后,制成精子乳液。观察精子活动度,精子存活率及精子计数了解小鼠精子情况。分离肝脏、肾脏、睾丸及右侧附睾,计算肝指数、肾指数、睾丸指数及附睾指数。将左侧睾丸制成组织匀浆,测蛋白,MDA,SOD,GSH,NO,NOS,I-NOS及γ-GT。妊娠第16日处死孕鼠,剖腹取胎仔记录死胎、活胎及吸收胎数,计算妊娠率、妊娠抑制率、平均活胎数、平均死胎数及平均吸收胎数。处死雄性小鼠30只,解剖取附睾,制成精子乳液,与不同浓度纯化雄黄液混合,显微镜下观察精子活动情况。2. 建立移植瘤小鼠S180肉瘤模型,将50只雌鼠随机分为对照组,环磷酰胺(CTX)组,纯化雄黄高剂量组,中剂量组和低剂量组共5组。按组别不同分别给予含0.2%羧甲基纤维素钠的生理氯化钠溶液灌胃每天一次,CTX(100mg·kg-1)腹腔注射一次,纯化雄黄高、中、低剂量组(2g·kg-1、1g·kg-1、0.5g·kg-1)每天灌胃一次。14d眼眶取血(用于计数白细胞和体外细胞培养)后,脱臼处死荷瘤小鼠,称取瘤重、胸腺重及脾脏重,计算抑瘤率、胸腺指数及脾脏指数。将大鼠8只随机分为对照组,纯化雄黄高剂量组,中剂量组和低剂量组共4组,用药同小鼠,10d后乙醚麻醉腹主动脉取血,离心取血清用于体外细胞培养。通过血清药理学研究方法并采用MTT法观察对EC9706增殖抑制作用。 结果:1. 纯化雄黄降低精子存活率及精子活动度从而使雌鼠妊娠率下降,妊娠抑制率上升,导致对雄性小鼠生育能力的影响;相关脏器系数各组之间无差异;睾丸组织中SOD水平下降,MDA水平上升;与对照组相比,γ-GT水平纯化雄黄各组无差异,CTX 组较高;GSH、NOS、NO及I-NOS各组无差异;纯化雄黄8%体外杀精作用最强,0.5%杀精作用最弱,杀精作用与浓度成正相关。2. 纯化雄黄可抑制小鼠S180肉瘤生长,高、中、低剂量组抑瘤率分别可达39.06%、29.2%、21.12%;对免疫器官无明显影响;荷瘤小鼠血清以及大鼠灭活血清均可抑制人食管癌细胞株EC9706生长且在48h抑制作用达到最强,分别为42.93%、27.66%,因此纯化雄黄在体外具有抑制肿瘤细胞生长的作用。 结论:纯化雄黄体内外和明显的肿瘤抑制作用。
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