胃癌在亚洲有很高的发病率，也是世界上最常见致死性疾病之一。虽然在一些国家，其发病率与致死率有所下降，但从全球范围看其发病率依然居高不下。位于胃幽门粘膜处的G细胞(gastrin-containing cell)是胃泌素合成与分泌的最重要细胞。胃泌素既可调节胃酸的分泌，亦可刺激胃粘膜的增殖。胃癌细胞系中，肿瘤细胞以自分泌和旁分泌的方式分泌胃泌素。在胃癌细胞系BGC-823中，胃泌素被证明是胃癌细胞的生长因子。此外，与正常胃粘膜上皮细胞相比较，胃癌细胞对胃泌素增殖作用更为敏感。在胃腺癌病人中，胃泌素表达检出率为47.7％(133／279)。胃泌素还具有抗凋亡的效应，并与肿瘤的侵袭和转移有关。因此，胃泌素基因有可能作为胃癌基因治疗的一个有效的靶基因。 RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指内源性或外源性的一段与目的基因互补的小干扰双链RNA，导入细胞后产生的转录后基因沉默现象。RNAi己被成功用来抑制多种生物的基因表达，更为引人注目的是，其可以作为治疗肿瘤的新手段。在哺乳动物细胞内，RNAi最初被用做诱导目的基因沉默的工具。Elbashir等人，首次成功的将长度为21～23nt的dsRNA导入鼠与人的细胞，避免了长于30nt的dsRNA所激活的抗外源病毒侵袭的干扰素反应。试验证明小干扰RNA(small interferingRNA，siRNA)能有效的诱发哺乳动物细胞的靶基因沉默反应。 本实验针对胃泌素mRNA，筛选4个不同的靶位点，3个位点位于胃泌素mRNA的编码区内，另一位点位于其3’非翻译区(3’untranslated region，3’UTR)。将4条shRNAs，以lOnm／L、20nm／L、40nm／L和80nm／L的终浓度，分别转染BGC～823胃癌细胞系，在24h、48h、72h分别收获细胞。应用原位杂交及免疫组化技术，检测低分化胃癌细胞系BGC-823中，胃泌素在mRNA和蛋白质水平的抑制效应。筛选有效的shRNA、浓度及作用时间。 对筛选的有效的shRNA序列、浓度及作用时间，应用RT-PCR、MTT实验、流式