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[目的](1)研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞(OB)分化过程中的增殖能力、分化能力和Runx2的表达。(2)建立MM细胞系(U266细胞株)和MSCs共培养体系,研究骨髓瘤细胞对MSCs增殖能力、OB形成能力和Runx2表达的影响。[方法](1)以4例有明显骨质破坏的MM患者为研究对象。对照组为2例缺铁性贫血和1例特发性血小板减少性紫癜。采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化骨髓MSCs,用含地塞米松(10-8 mol/L)、维生素C(0.05g/L)和β-甘油磷酸钠(10-2mol/L)的L-DMEM条件培养液诱导第3至5代MSCs向OB分化,诱导的第1至7天内,采用CCK-8试剂盒检测MSCs的增殖能力。诱导的第14天和第28天,分别采用碱性磷酸酶(ALP)染色和钙结节(Von-Kossa)染色检测MSCs的OB形成能力。应用RT-PCR技术检测MSCs诱导0、24、48、72 h Runx2的表达。(2)研究对象为2例缺铁性贫血和1例特发性血小板减少性紫癜。采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化骨髓MSCs,培养3~5代后,诱导MSCs向OB分化,待细胞融合至60%~70%时,分两组,一组加U266细胞株共同培养(共培养组),另一组不加U266细胞株(对照组)。CCK-8试剂盒检测共培养组和对照组第1至7天内MSCs的增殖能力。ALP染色和Von-Kossa染色检测OB形成能力,RT-PCR检测诱导72 h时Runx2的表达。[结果](1)倒置显微镜下观察,MM组与对照组MSCs一般形态无明显差异。但在诱导过程中,MM组增殖能力低于对照组,平均光密度值(AOD)分别为1.195±0.631( x±s)和1.493±0.890(P<0.01)。诱导14和28天后,MM组MSCs ALP表达显著低对照组,IOD sum/Area sum值分别为0.204±0.050和0.339±0.034(P<0.01),钙结节形成能力也显著低于对照组,平均钙结节个数分别为11.1±6.14个和16.7±5.61个(P<0.01)。MSCs Runx2在诱导前呈低表达,诱导72h后呈高表达,MM组Runx2的表达明显低于对照组Runx2/GAPDH平均光密度值分别为0.412±0.199和0.734±0.149(P<0.01)。(2)在共培养体系中,U266细胞株和MSCs共培养的前3天,MSCs增殖能力无明显变化,两组AOD值分别为0.731±0.020和0.805±0.152(P>0.05),至第6天,共培养组的MSCs增殖能力明显低于对照组,AOD分别为0.560±0.034和2.283±0.145(P<0.05)。与对照组相比,共培养组MSCs向OB分化过程中ALP的表达显著降低,IOD sum/Area sum值分别为0.138±0.038和0.376±0.044(P<0.01),钙结节的形成(平均钙结节个数分别为6.7±2.75个和15.3±8.99个,P<0.01。)和Runx2的表达(Runx2/GAPDH平均光密度值分别为0.238±0.168和0.653±0.343,P<0.01)也显著降低。[结论](1)MM患者骨髓MSCs的增殖能力和OB形成能力下降。(2)MSCs在向OB分化过程中,早期便强表达Runx2, MM组的表达明显低于对照组。(3)MM患者骨髓MSCs的增殖能力和OB形成能力下降可能与Runx2的表达减低有关。(4)骨髓瘤细胞可抑制骨髓MSCs向OB分化的增殖能力和OB形成能力,也抑制其Runx2表达。