VEGF-165基因对下肢静脉血栓后血管重塑的作用

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目的:观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)移植治疗慢性深静脉血栓的疗效。方法:1、结扎家兔(2.5kg左右)肾下段后腔静脉建立慢性深静脉血栓模型,随机分成三组,即:A组、B组和C组,每组20只动物。2、人胚肾细胞293A(HEK293A)扩增腺病毒至适当的滴度。3、打开腹腔在血栓段远端注射,行移植实验:A组:注射10μL携带有VEGF165基因的免疫缺陷型腺病毒(Ad-GFP-VEGF165),病毒基因组滴度10~9PFU/ml;B组:注射10μL空白质粒载体(Adv-GFP);C组:注射10μl生理盐水。4、不同时间段取出血栓段下腔静脉及血栓,应用HE染色及vWF免疫组化染色观察血栓机化、血管再通情况,高倍显微镜下计数血栓中再通毛细血管数量。结果:1、经HEK293A细胞扩增可获得高滴度的腺病毒。2、构建兔下腔静脉慢性血栓模型方法简单、快速、血栓形成确切;3、VEGF165基因移植能明显促进血栓机化、血管再通,促进侧支循环形成。结论:经VEGF165基因移植后明显加快血栓机化、增加血管再生数量。
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