【摘 要】
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目的:探究不同处理时间、浓度的内皮素-1（ET-1,endothelin-1）刺激大鼠软骨细胞过程中对缺氧诱导因子-1、2（HIF-1、2）基因表达水平的影响及机制。方法:以50只雄性SD大鼠（胎龄4.07±0.27周,体重90.57±3.65g,MEAN±SEM）作为研究对象,分成2组,每组25只,提取双侧髋关节股骨头,培养软骨原代细胞。传代后第一组根据内皮素-1处理的时间分成5组（每组样本数=
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目的:探究不同处理时间、浓度的内皮素-1（ET-1,endothelin-1）刺激大鼠软骨细胞过程中对缺氧诱导因子-1、2（HIF-1、2）基因表达水平的影响及机制。方法:以50只雄性SD大鼠（胎龄4.07±0.27周,体重90.57±3.65g,MEAN±SEM）作为研究对象,分成2组,每组25只,提取双侧髋关节股骨头,培养软骨原代细胞。传代后第一组根据内皮素-1处理的时间分成5组（每组样本数=5）:对照组、30min组、1h组、2h组、4h组。每组应用实时荧光定量多聚酶链式反应（q PCR）ΔΔСт法分别观察ET-1的浓度在0n M,1n M,10n M,100n M,1μM时HIF-1、2,SOX-9,MMP-13基因表达水平。第二组将ET-1以10n M刺激软骨细胞1h,并应用ET-1A、B受体阻断剂BQ123、BQ788阻断ET-1受体。分成对照组,ET-1组（10n M/1h）、BQ123组（3μM）、BQ788组（3μM）、BQ123+BQ788组（3μM+3μM）阻断ET-1受体,观察HIF-1、2基因表达水平。应用SPSS23.0软件进行多因素重复测量方差分析（Repeated measures ANOVA）,对实验数据进行分析。结果:第一组ET-1在10n M-1μM浓度范围处理软骨细胞1h时,HIF-1、2基因表达逐渐上调,HIF-2基因表达在4h时逐渐回落;ET-1在10n M-1μM范围处理2h时SOX-9基因表达上调,ET-1在100n M-1μM范围,4h持续存在显著变化。ET-1在10n M-1μM范围处理2h时MMP-13基因表达上调,4h持续存在显著变化。第二组BQ123组、BQ788组、BQ123+788组处理后HIF-1、2不同程度下降。结论:早期ET-1可刺激软骨细胞HIF-1、2基因表达增加。这种变化是通过ET-1的A、B受体的激活协同完成。
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