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由于化学杀虫剂的大量使用,一些主要农业害虫对化学杀虫剂产生的抗药性问题越来越严重。细胞色素P450酶系是昆虫对化学杀虫剂和植物毒素解毒的重要酶系,P450酶活性的增强与棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂和植物毒素产生抗药性有关。RNAi是近年来产生的一项新兴生物技术,是利用dsRNA诱导序列特异的转录后基因沉默,能够对多种生物中的基因进行沉默。本实验选择与拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性有关的棉铃虫细胞色素P450基因CYP9A14、CYP9A17、CYP9A12、CYP6B7以及与植物毒素棉酚抗药性有关的基因CYP6AE14,以双链RNA干扰的方法构建了含有反向重复序列的P450基因CYP9A14及其截短片段CYP9A14t、CYP9A17及其截短片段CYP9A17t、CYP9A12、CYP6B7、CYP6AE14保守片段的重组棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)。将重组病毒感染HzAM1细胞,获得高滴度的BV后,注射到氯氰菊酯抗性棉铃虫幼虫的血淋巴中。其中感染vHaBac-CYP9A14t的棉铃虫幼虫中肠的CYP9A14的转录水平有极显著的下降,感染vHaBac-CYP9A17t和vHaBac-CYP6AE14的棉铃虫幼虫中肠的CYP9A17和CYP6AE14的转录水平也有显著性下降。而感染vHaBac-CYP9A14、 vHaBac-CYP9A17、vHaBac-CYP9A12、vHaBac-CYP6B7和对照病毒vHaBac-EGFP相比,基因的转录水平没有显著性差异。生物测定结果表明棉铃虫核型多角体病毒与氯氰菊酯联合作用能显著增强对氯氰菊酯抗性棉铃虫幼虫的杀虫效果。然而, vHaBac-CYP9A14t与氯氰菊酯联合作用的增效程度和对照病毒vHaBac-EGFP与氯氰菊酯联合作用的增效程度相当。同样,vHaBac-CYP9A14t与vHaBac-CYP9A17t等浓度等体积混合的病毒与氯氰菊酯联合作用的增效程度也和对照病毒vHaBac-EGFP与氯氰菊酯联合作用的增效程度相当。本实验证明以棉铃虫核型多角体病毒为载体对棉铃虫基因进行干扰是可行的途径,为以后研究棉铃虫或其他昆虫基因的功能,以及通过这一类杆状病毒与拟除虫菊酯类杀虫剂的联合作用治理抗性棉铃虫或其他农业害虫等方面开辟了新的途径,同时也为RNA干扰在棉铃虫等害虫防治领域的普遍应用提供理论依据和新的思路。