建立JAKs/STATs信号通路激活的银屑病细胞学模型的研究

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银屑病是一种由T细胞介导的常见且易反复发作的慢性炎症性皮肤病。临床上主要表现为红斑、鳞屑、瘙痒,病程较长,顽固难愈,为患者的身心带来极大的伤害。关于银屑病的发病机制目前尚不明确,近年来银屑病的发病率有逐年增高的趋势,因此进一步研究该病的发病及相关治疗方法具有重要意义。本文主要包括文献综述及实验研究两部分。第一篇文献综述了JAKs/STATs信号通路与银屑病的研究进展,主要对近年来有关于该条通路的组成、传导及调控途径、参与银屑病发病机制的作用的相关研究成果进行了概括和总结。 第二篇文献主要针对近十年来关于血热型银屑病的中医内治法的相关临床及实验研究成果进行总结,并从中医对于银屑病的认识入手,明确血热型银屑病的概念并分析其证候成因。实验研究主要通过运用IFN-γ、IL-6细胞因子刺激HaCat细胞,建立JAKs/STATs信号通路激活的银屑病体外细胞学模型,并运用Real-time PCR方法对该通路相关SOCS-1、IL-6、IL-8及TNF-α基因的表达进行检测,从而选择最佳的刺激时间及浓度组。目的:建立JAKs/STATs信号通路激活的体外银屑病细胞学模型。方法:(1)设置不同的IFN-γ、IL-6刺激浓度,并分为24h、48h、72h,3个不同时段。(2)运用Real-time PCR方法检测通路相关细胞因子SOCS-1、IL-6、IL-8及TNF-α基因的表达水平。(3)运用SPSS 21.0对不同刺激组的相关数据进行统计学分析,选择最佳组,当p<0.05为具有统计学意义。结果:(1)24小时组, 相关细胞因子:SOCS-1的表达有上升,具统计学意义(p<0.05),IL-6、IL-8、TNF-α的表达有上升,但无统计学意义(p>0.05)。(2)48小时组, 相关细胞因子:SOCS-1、IL-6、TNF-α的表达均有明显上升,具统计学意义(p<0.05),IL-8表达有上升但无统计学意义(p>0.05)。(3)72小时组, 相关细胞因子:SOCS-1的表达有上升,具统计学意义(p<0.05), IL-6、IL-8、TNF-α的表达有上升,但无统计学意义(p>0.05)。(4)对SOCS-1、IL-6、IL-8、TNF-α四种细胞因子的表达含量检测表明,同一种细胞因子在各自3个时间组之间均遵循相同的变化规律,其中IFN-γ 50ng/ml、IL-6 10ng/ml浓度组表达最佳。结论:(1)运用IFN-γ、IL-6刺激HaCat细胞激活JAKs/STATs信号通路的银屑病体外细胞学模型建立成功。(2)最佳刺激因素可选择IFN-γ 50ng/ml、IL-610ng/ml这一浓度组刺激48小时。
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