嗜麦芽菌素P28是嗜麦芽寡养单胞菌P28产生的细菌素,结构类似于肌尾噬菌体尾部。它的基因簇预测含23个基因,orf1-orf9是非结构基因,orf10-orf23是结构基因,其中orf17和orf18是主要的结构基因,分别编码尾鞘蛋白和尾管蛋白。本论文主要探究与嗜麦芽菌素P28释放相关的基因。生物信息学分析提示orf7编码的ORF7可能是穴蛋白（holin）,orf8编码的蛋白可能是内溶素（endolysin）,Holin和endolysin一起组成裂解系统来完成嗜麦芽菌素P28的释放。本文首先通过RT-PCR方法检测了orf6-orf9的m RNA,发现orf6、orf7、orf8和orf9均转录,并且orf6-orf9共转录,由于已知orf6与orf5不在同一个操纵子中,orf9与orf10也不在同一个操纵子中,因此,orf6-orf9处于同一操纵子。接着,为了探究orf7-orf9与嗜麦芽菌素P28的释放是否相关,构建了双基因缺失菌株P28Δ7-8和P28Δ8-9,以及三基因缺失菌株P28Δ7-9。将这3株突变株和单基因缺失突变株P28Δ7、P28Δ8和P28Δ9分别培养,结果显示这些缺失菌株的生长与P28菌株没有明显差别,检测上清的杀菌活力发现分别缺失orf7和orf8的会导致嗜麦芽菌素P28释放延迟约2 h,而双缺失会延迟约4 h,orf9的缺失则没有明显影响。结果说明orf7和orf8与嗜麦芽菌素P28的释放相关,orf9与嗜麦芽菌素P28的释放无关。菌株P28Δ4-6N缺失了orf4到orf6的序列,它的培养物上清无杀菌活力,Western blot也检测不到尾鞘蛋白,但胞内有大量尾鞘蛋白,推测可能是嗜麦芽菌素P28的释放过程受阻。结构基因orf10-orf23由两个预测的启动子启动转录,分别是在orf10前的启动子P10和orf17前的启动子P17。将菌株P28Δ4-6N中启动子P10换成强启动子P3构建了菌株Δ4-6N(P10-P3),检测发现Δ4-6N(P10-P3)培养物上清有显著杀菌活性,说明Δ4-6N(P10-P3)能正常合成嗜麦芽菌素P28并释放到胞外,不影响嗜麦芽菌素P28的释放。为探明嗜麦芽菌素P28基因簇中的裂解基因,本论文将orf1到orf9这9个非结构基因全部敲除,构建了菌株P28Δ1-9。与菌株P28Δ4-6N一样,P28Δ1-9的培养物上清无杀菌活力,也没有检测到尾鞘蛋白,但胞内可检测到尾鞘蛋白。将菌株P28Δ1-9中orf10前的启动子P10换成P3,上清中检测到了杀菌活力,表明orf1-orf9的缺失并不能阻断嗜麦芽菌素P28的释放,提示在orf1-orf9之外存在其它的嗜麦芽菌素P28释放基因。最后,本论文试图采用转座子随机突变的方法筛选与嗜麦芽菌素P28释放相关的基因,但是目前还没有获得相关的突变菌株。总之,本文确定了orf7和orf8是与嗜麦芽菌素P28释放相关的基因,orf7编码holin,orf8编码endolysin。同时,除orf7和orf8外,还有其它的嗜麦芽菌素P28释放基因,需要进一步研究。