本文针对赤芝(Ganoderma lucidum)菌草工厂化生产过程中存在的一些关键技术进行研究,主要分为4个部分进行。第一,对21个灵芝菌株进行分类鉴定,筛选出赤芝菌株。第二,以试管为容器通过发菌、出菇进行初筛试验,排除不适合用菌草栽培的赤芝菌株和不适合栽培赤芝的菌草配方。第三,通过工厂化栽培试验,综合分析赤芝菌丝及子实体生长情况、商品性状、产量以及有效成分等方面,筛选出最佳的菌草配方和赤芝菌株。第四,工厂化栽培条件的优化,探讨栽培条件对子实体各方面的影响规律,获得最佳的栽培条件及栽培条件对子实体影响的规律。主要的研究结果如下:(1)灵芝菌株亲缘关系鉴定试验通过拮抗试验、ITS序列分析和RAPD技术对21个灵芝菌株进行分类鉴定和遗传多样性分析。拮抗试验结果表明:大部分菌株之间均存在不同程度的拮抗作用,少数菌株之间没有拮抗或拮抗极不明显。ITS序列分析结果表明:各菌株间遗传距离的变化范围在0.000～0.072之间,平均遗传距离为0.039;与GenBank比对结果显示21个菌株分为4类,其中4号、5号、11号、12号、13号、15号、16号、17号和19号菌株属于Ganoderma lucidum,且亲缘关系均比较近。RAPD结果表明:各菌株之间的相似系数达到0.8以上,说明各菌株间的亲缘性均较近,其中1号菌株和3号菌株的相似系数达到0.95,很可能是同种异名。综合结果表明,三种方法结论相一致。成功将21个灵芝菌株进行了分类鉴定并筛选出了 9株赤芝菌株。(2)赤芝菌株对菌草基质的适应性比较研究采用试管栽培方法对16个菌草配方和9株赤芝菌株进行筛选优化。通过菌株菌丝生长速度及长势、原基形成时间、培养周期、子实体壮实度、生物学效率等方面的综合分析,初步排除不适合菌草栽培的赤芝菌株和不适合赤芝菌株生长的菌草配方。研究结果表明:赤芝菌株(Ga0801、Ga0805、Ga0042、赤 8)和菌草配方(1 号、2 号、6 号、7号、8号、10号、24号、26号)的综合表现要优于其它菌株和菌草配方。(3)赤芝菌草工厂化栽培配方与菌株筛选试验对初步筛选出的4个赤芝菌株和8个菌草配方进行工厂化栽培管理,选取单筒产量、产投比、三萜含量、多糖含量和总糖含量5项对配方和菌株进行灰色关联度分析,筛选出最佳菌草配方和最佳菌株。与CK相比,菌草配方栽培出的4个不同赤芝菌株的子实体的有效成分提高的幅度均比较大,有的甚至呈现倍数增长,结果表明,菌草配方栽培赤芝在一定程度上要优于木屑栽培赤芝;其中2号菌草配方栽培的赤芝综合表现最好,综合效益最高,且2号配方为单一草种配方,具有成本更低,配料简单,生产操作简便等优点。因此,本试验的最佳配方为菌草2号配方,即:五节芒78%,麸皮20%,石膏2%。菌草2号配方栽培的4个赤芝菌株中,综合表现最好、污染率最低的是菌株Ga0042。(4)赤芝菌草工厂化栽培环境条件优化本研究主要对工厂化栽培赤芝的温度和CO2两个环境因子进行系统的研究。通过测量子实体的各项指标来确定最佳的出菇温度和CO2浓度。研究结果表明:温度对赤芝子实体的影响显著,在试验温度区间内,子实体菌盖直径、菌盖厚度、产量、生物转化率均随着温度的升高而呈现先上升后下降的趋势,最大值出现在25℃左右;子实体三萜含量则随着温度的升高呈线性下降趋势,温度越高,三萜含量越低;而子实体多糖含量则随着温度的升高而升高,温度越高,多糖含量上升越快。综合分析得,26℃为最适培养温度,在此温度下,子实体综合表现最好。在CO2试验区间内,CO2对灵芝子实体菌盖直径、厚度和菌柄直径的影响显著,它们均随着CO2浓度的升高而呈现先上升后下降的趋势,最高值在0.05%～0.06%之间,而CO2对子实体产量的影响并不显著。子实体三萜和多糖含量均随着CO2的升高而呈现先下降后上升的趋势,影响显著。