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目的:1.观察不同浓度小檗碱对人肿瘤细胞株(HepG2)细胞生长的影响,寻求体外干预实验的最佳药物浓度。2.观察小檗碱对人肿瘤细胞株(HepG2)细胞肝细胞核因子(HNF1α、HNF1β、HNF4α、HNF6)mRNA表达和糖代谢相关激酶(葡萄糖激酶、L-丙酮酸激酶、磷酸烯醇式丙酮酸激酶)作用的影响,探讨小檗碱治疗糖尿病的分子机制。方法:1.体外培养HepG2细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验检测不同浓度的小檗碱(0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100、300μmol/L)对HepG2细胞生长的影响。2.对不同浓度小檗碱(0、0.1、0.3、1、3、10、30μmol/L)和1mmol/L二甲双胍处理24h后HepG2细胞,采用RT-PCR方法检测其肝细胞核因子基因的表达,同时采取6-磷酸葡萄糖脱氢酶耦联比色法测定GK活性、丙酮酸耦联乳酸脱氢酶比色法测定L-PK活性和乳酸脱氢酶法耦联比色法测定PEPCK活性。结果:1.不同浓度的小檗碱对HepG2细胞生长的作用呈剂量依赖性。当小檗碱浓度低于1μmol/L时,对细胞生长增殖没有明显影响,当小檗碱浓度低于10μmol/L时,对生长增殖有轻度影响,当小檗碱浓度高于30μmol/L的时候,能够明显抑制HepG2细胞生长增殖。2.与对照组比较,小檗碱能够一定程度下调HepG2细胞HNF1α、HNF1β、HNF4α和HNF6 mRNA的表达,增高GK和L-PK活性,降低PEPCK活性。结论:1.小檗碱浓度(≤1μmol/L)对HepG2细胞生长增殖没有明显的影响,小檗碱浓度(≤10μmol/L)对HepG2细胞生长增殖有轻度影响,小檗碱浓度(≥30μmol/L)能够明显抑制细胞生长增殖。2.小檗碱下调HepG2细胞HNFs mRNA表达,调节肝脏葡萄糖代谢相关激酶活性,这可能是其治疗糖尿病的机制之一。