高迁移率蛋白Ⅰ（high mobility group protein Ⅰ，HMGI或HMGAla）属于非组蛋白的染色质结合蛋白，是迄今发现的最主要转录结构因子（architectural transcription factor）之一，广泛参与基因的转录调节，并且涉及染色质调整（chromatin remodeling），与细胞增殖、分化、凋亡和肿瘤转化等过程的调控关系密切。同时它也是一种磷酸化修饰蛋白，但目前有关蛋白激酶C（PKC）对其调节的研究不多。 血小板源生长因子-B链（platelet-derived growth factor-B chain，PDGF-B）基因的诱导表达涉及动脉粥样硬化等疾病的发生、发展过程。目前对PDGF-B基因表达调节的详细机制也尚未完全了解。 本研究观察体外PKC对HMGI的磷酸化作用，阐明其作用位点；着重观察HMGI与PDGF-B基因上游调控序列的结合及对该基因转录的调节作用，并且通过对磷酸化位点的定点突变，观察PKC磷酸化对HMGI调节PDGF-B基因转录的影响。 结果显示，PKCα可使重组人HMGI蛋白迅速发生磷酸化，化学计量约为2.0～2.5mol／mol。将磷酸化的rHMGI蛋白用蛋白酶Lys-C裂解，分离得到3个主要放射性肽段P1、P2和P3，³²P掺入比为1：0.3：1。薄层层析和水平电泳分离显示，P1和P3的磷酸化氨基酸都是丝氨酸（Ser），而P2为苏氨酸（Thr）。氨基酸测序结果表明，P1的序列为RPRGRPKGS⁶⁴K，P3的序列为RGRGRPRKQPPKQPPVSPGTALVGS⁴⁴QK，表明P1和P3的磷酸化氨基酸分别为Ser64和Ser44。P3的序列为⁷⁵TTTTPGRKPRGRPK⁸⁸，尚难确定其中具体的磷酸化Thr，但总体的磷酸化水平很低，不到P1和P3中Ser的30％。Ser64在HMGI第2个“AT-hook”的C-末端近侧，而Ser44位于第1和第2个“AT-hook”之间的连接肽上。这2个磷酸化位点与CDC2和CK2在HMGI（Y）上的磷酸化位点都不同，表明HMGI的PKC磷酸化位点是独特的。 将PDGF-B基因-1758／+43bp的片段用限制性内切酶DdeI充分酶切，切割成约100-300bp的小片段，然后与HMGI进行结合反应。EMSA结果