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目的：原发性肝癌(简称肝癌，primary carcinoma of the liver)是我国最常见的恶性肿瘤之一，每年因原发性肝癌死亡的人数约有11万人，约占全球肝癌死亡人数的45%[1]。本病恶性度高、进展快，自出现临床症状至死亡，一般为4～6月，短者仅1～2月。其中肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma, HCC)占原发性肝癌的90%[2]。以手术切除为主的综合治疗是目前肝细胞癌治疗最有效的方法。然而肝细胞癌根治性切除后病人的5年复发率高达61.5％，即使是小肝癌术后5年复发率也高达为43.5％[3]，这成为肝细胞癌临床治疗的难题。转移复发问题如不能解决，则切除术后的远期疗效将难以提高，从而影响整个肝癌的预后。随着分子生物学技术的发展，肿瘤相关研究不断深入，人们发现许多肿瘤中存在着一些具有干细胞(stem cells, SC)特性的肿瘤细胞，即肿瘤干细胞(cancer stemcells, CSCs)。这种肿瘤干细胞与肿瘤的生长、发展、复发和转移存在着密切的关系。目前研究表明肿瘤干细胞具有自我更新、无限增殖和多向分化的能力，虽然只占肿瘤组织中很少的一部分，但却在肿瘤发生发展过程中起着决定性的作用。而这些肿瘤干细胞大多数处于静止状态，能逃避放化疗的杀伤，是肿瘤复发和转移的根源。肿瘤干细胞理念的提出为肿瘤的治疗提供了新的方向。肿瘤中维持干细胞自我更新和增殖机制的一些调控因子的研究是肿瘤干细胞研究的重要内容。OCT4、SOX2和NANOG是目前公认的干细胞调控因子，在维持干细胞自我更新、增殖和多向分化潜能方面起到十分重要的作用。目前关于OCT4、SOX2、NANOG与胃癌、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、膀胱癌等多种恶性肿瘤关系的报道较多，而在肝癌中的研究报道尚少。本研究通过对肝细胞癌组织、癌旁组织及正常肝组织中OCT4、SOX2、NANOG表达的检测，分析其与患者临床病理特征之间的关系，探讨其在肝细胞癌的发生、发展中的作用和临床意义。方法：收集2010年3月至2011年12月河北医科大学第四医院肝胆外科手术切除的标本。其中原发性肝细胞癌标本50例，癌旁组织44例，正常肝组织14例。将癌组织、癌旁组织和正常肝组织分别采用免疫组织化学染色法(SP法)和RT-PCR法检测干细胞调控因子OCT4、SOX2和NANOG在蛋白及核酸水平的表达情况。结果数据应用SPSS13.0统计软件进行统计分析，采用χ~2检验、t检验和spearman等级相关分析方法，分析其与肝癌临床生物学特点的关系及其相互关系。结果：1OCT4、SOX2和NANOG在肝癌组织及癌旁组织中均有表达，在正常肝组织中几乎无表达。OCT4在肝癌、癌旁和正常肝组织中蛋白的阳性表达率依次为76%(38/50)、54.5%(24/44)、7.1%(1/14)，OCT4mRNA的表达水平依次为1.002士0.180、0.807士0.187、0.029士0.007；SOX2在肝癌、癌旁和正常肝组织中蛋白的阳性表达率依次为62.0%(31/50)、40.9%(18/44)、0%(0/14)，SOX2mRNA的表达水平依次为0.283士0.075、0.181士0.036、0.022士0.002；NANOG在肝癌、癌旁和正常肝组织中蛋白的阳性表达率依次为82%(41/50)、63.6%(28/44)、0%(0/14)，NANOGmRNA的表达水平依次为0.410士0.148、0.291士0.070、0.026士0.007。OCT4、SOX2和NANOG在肝癌组织中的表达均显著高于癌旁组织及正常肝组织（P<0.05）。2在肝癌组织中，Ⅲ、Ⅳ期组OCT4、SOX2和NANOG的蛋白的阳性表达率依次为90.0%(27/30)、80.0%(24/30)、96.7%(29/30)，OCT4、SOX2和NANOG的mRNA表达水平依次为1.106士0.123、0.327士0.049、0.489士0.124；Ⅰ、Ⅱ期组OCT4、SOX2和NANOG的蛋白的阳性表达率依次为55.0%(11/20)、35.0%(7/20)、60.0%(12/20)，OCT4、SOX2和NANOG的mRNA表达水平依次为0.813士0.083、0.201士0.021、0.270士0.051。Ⅲ、Ⅳ期组OCT4、SOX2和NANOG的表达均显著高于Ⅰ、Ⅱ期组（P<0.05）。低分化癌组（Ⅲ、Ⅳ级）OCT4、SOX2和NANOG的蛋白的阳性表达率依次为92.6%(25/27)、85.2%(23/27)、100%(27/27)，OCT4、SOX2和NANOG的mRNA表达水平依次为1.177士0.079、0.359士0.021、0.544士0.112；中高分化癌组（Ⅰ-Ⅱ级）OCT4、SOX2和NANOG的蛋白的阳性表达率依次为56.5%(13/23)、34.8%(8/23)、60.9%(14/23)，OCT4、SOX2和NANOG的mRNA表达水平依次为0.870士0.104、0.230士0.043、0.306士0.064。低分化癌组（Ⅲ、Ⅳ级）OCT4、SOX2和NANOG的表达均显著高于中高分化癌组（Ⅰ、Ⅱ级）（P<0.05）。而OCT4、SOX2和NANOG的表达均与患者的性别、年龄和肿瘤大小等因素无关(P>0.05)。3肝癌组织中OCT4与SOX2、SOX2与NANOG、OCT4与NANOG的表达均呈正相关关系（P<0.05）。结论：1干细胞转录调控因子OCT4、SOX2、NANOG在肝癌组织中的表达水平显著高于癌旁和正常肝组织。说明OCT4、SOX2、NANOG与肝癌的发生、发展有关。2OCT4、SOX2、NANOG表达与肝癌患者的临床分期及肿瘤的分化程度有关，而与患者的年龄、性别、肿瘤大小等因素无关。说明OCT4、SOX2、NANOG与肝癌的生物学特性有关。3肝癌组织中OCT4与SOX2、SOX与NANOG、OCT4与NANOG的表达均呈正相关关系。提示在肝癌组织中OCT4、SOX2、NANOG之间存在着相互作用和联系，共同促使着肝癌的发生发展。4肝癌组织中OCT4、SOX2和NANOG三者联合检测更能准确反映肝癌的生物学特性。