论文部分内容阅读
辅酶Q10(CoQ10)是一种重要的维他命样脂溶性物质,主要位于细胞线粒体。作为至少三种线粒体酶(复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)的辅酶,它参与线粒体呼吸链上氧化磷酸化反应中的电子传递,因而是细胞能量三磷酸腺甙(ATP)生成过程中不可缺少的组成成分。CoQ10同时也是一种重要的抗氧化物质,有保持细胞膜稳定的功能,即能防止膜脂质过氧化和保持膜流动性,因此其在脂蛋白以及血浆中的含量被认为体内氧化应激的标志。CoQ10的含量水平和很多疾病的发生、发展都直接或间接相关,检测CoQ10的含量具有重要的医学意义。过去对CoQ10的研究主要集中在心脏疾病治疗方面,对内分泌疾病如甲状腺疾病的研究较少。 本文优化了测定CoQ10的SPE-HPLC方法,通过对固相萃取(SPE)柱容量的选择,大大提高了测定的灵敏度。选用合适的提取溶剂,简化了血浆样品的预处理过程,并建立了测定血浆CoQ10的HPLC方法。针对测定过程中存在繁琐、耗时的手动样品预处理问题,构建了一个样品预处理和分离一体化的柱切换液相色谱在线系统,并首次在该系统上建立了分析血浆CoQ10的方法,实现了血样的自动预处理、自动进样以及CoQ10的自动分离和定量功能。大大减少了所需的样品量和分析时间,提高了分析结果的精密度。该方法灵敏度高,检测限达0.1mg/L。应用该方法测定了甲亢、甲减以及正常人血浆CoQ10的含量水平,比较了三者含量水平的显著性差异,同时探索了CoQ10的含量与甲状腺激素之间的相关性关系。结果表明,甲亢病人血浆CoQ10浓度最低,甲减病人较高,与正常对照组相比较,均存在显著性差异,CoQ10的含量与甲状腺激素之间存在显著的线性负相关关系。 此外,本文首次建立了化妆品中CoQ10含量测定的RP-HPLC方法,该方法利用固相萃取(SPE)技术浓缩和净化样品,有效地保护了柱寿命,同时该方法重现性好,灵敏度高(检测限达0.04mg/L)。用该方法对同一品牌的系列化妆品中CoQ10进行了测定,两者的含量基本一致。