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糖基化是蛋白质翻译后修饰最重要的形式之一,据估计在人体内超过50%的蛋白质发生了糖基化。糖基化异常在癌症生物学中的重要作用已逐渐得到认识。最近几年,利用糖组学分析方法寻找各种癌症的糖链生物标志物已成为糖生物学研究的热点。随着生物质谱技术的迅速发展及其在糖组学和蛋白质组学研究中的广泛应用,为特异性更高的糖链生物标志物的筛选提供了可能。本研究以人的原发性肝癌细胞系HepG2和正常肝细胞系L02为研究对象,从两种细胞系中提取总蛋白,采用酶解法释放N-糖链,还原性β-消除释放O-糖链,采用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对分离纯化后的2种细胞系的2种类型的糖链(N-/O-糖链)进行序列鉴定,采用内标质谱定量的方法对2种细胞系的2种类型的糖链分别进行定量比较分析。本研究为进一步探索肝癌中N-/O-糖链的表达特点和及早发现肝癌糖链生物标志物提供参考价值。得到以下研究结果：1.采用石墨碳柱纯化分离N-糖链,经条件优化后实现了中性糖与酸性糖的分离,在质谱检测时避免了高丰度糖链对低丰度糖链造成的离子抑制现象。2.N-糖链的分析结果表明,肝癌细胞系HepG2和正常肝细胞系L02中共检测到26种N-糖链,其中7种高甘露糖型糖链,10种唾液酸化糖链,9种唾液酸与岩藻糖同时修饰的糖链；HepG2与L02相比,大多数N-糖链在数量上都明显升高,t检验结果表明,其中15种糖链具有极显著性差异(p<0.01),1种具有显著性差异(p<0.05)。3.0-糖链的分析结果表明,肝癌细胞系HepG2中检测到10种O-糖链,L02中检测到9种O-糖链,发现HepG2中存在癌细胞中特有的缩短的O-糖链N1A1(NeuAc-GalNAc, sialyl Tn抗原),其它9种O-糖链是两种细胞系中共有的；HepG2与L02相比,t检验结果表明,在检测到的10种O-糖链中发现有5种糖链具有极显著性差异(p<0.01),2种具有显著性差异(p<0.05)。