树皮小蠹和蛇口壳目类真菌经过长期的协同进化,大部分形成了互惠互利的伴生关系,涵盖了昆虫对真菌的识别、昆虫和真菌的特异化、对真菌的携带和传播等很多方面的内容,这是一个动态全面的复杂过程。二者的互惠共生关系不仅促进了树皮小蠹更好地繁殖发展、占领新的生境,也促进了真菌的传播。本项目主要采用传统微生物学和现代分子生物学相结合的方法,对云南省昆明、丽江、大理、楚雄、香格里拉五地区横坑切梢小蠹的伴生蛇口壳目真菌进行深入研究,主要涉及伴生真菌的物种资源多样性、伴生真菌的形态学观察和分子鉴定、蛇口壳目类真菌的DNA条形码的筛选与评价三个方面。本项目于2017年8月在云南省五地区采集病疫木材和昆虫样品,并将其用采集袋封存转移至实验室进行分离纯化。原始分离平板达到254个,经过纯化得到纯净菌株400株。提取400株菌的DNA,并且扩增ITS基因序列片段,测序后确定涉及50个属,包含蛇口壳目类真菌6个属,共112株菌:Ceratocystiopsis、Graphilbum、Leptographium、Ophiostoma、Raffaelea、Sporothrix,占所有种属的28%。通过对蛇口壳属Opiostoma进行深入的分子研究,基于多基因:ITS、BT2、TEF的测序和系统发育分析,采用最大似然法（Maximum Likelihood,ML）构建系统发育树确定了5个蛇口壳属的疑似新种:YML185、YML208、YML209、YML210、YML212。形态学观察均发现了5菌株的产孢结构,YML208、YML210观察到了有性形态结构,YML185、YML209和YML212观察到了无性形态结构。综合分子系统发育和形态学观察的结果,对5个新种菌株进行描述报道。通过对云南地区的横坑切梢小蠹的伴生真菌的研究,初步明确了伴生真菌的物种多样性和优势种类,为云南地区横坑切梢小蠹的防治、蛇口壳目类真菌的了解和虫菌伴生关系提供了理论基础,也为该地区病虫害的检疫和监测等工作指明探究的方向和防治思路。