该研究利用离心、离子交换色谱等现代分离手段和分析方法,从牛血采集开始,利用离心技术分离得到血浆;根据钡盐吸附维生素K依赖的凝血因子的性质.研究了硫酸钡和柠檬酸钡两种钡盐盐沉淀吸附蛋白的效果,柠檬酸钡沉淀吸附效果较好;改进了柠檬酸钡沉淀上的蛋白洗脱方法,直接将柠檬酸钡沉淀加入到30??投攘蛩犸芤航谐恋碜辉倮昧蛩犸С恋淼鞍追旨都际醯玫侥蜃覺(FX)和凝血酶原等蛋白粗提物;采用离子交换层析技术(P-Sepharose柱、Mono Q柱、Resource S柱)成功分离得到了FX和凝血酶原组分,并成功地活化和纯化了FXa凝血酶,获得了电泳纯的产品,并且解决了与该项分离、活化和纯化路线相关的所有技术难点,建立了一种高效分离工艺路线.凝血因子X被RVV-X活化可以通过两条路径:(1)FX→FX<,β>→FX<,aβ>;(2)FX→FX<,aα>→FX<,aβ>.该研究以RVV-X作活化酶,通过电泳方法对FX的活化进行了观察,结果证明中间态的FXa<,α>比中间态的FX<,β>更稳定,也就是当降解肽被切割后,活化肽更容易从中间肽上脱除.作者们认为降解肽的功能可能是稳定血因子X的构象,其中的寡糖链结构可能起着关键的作用.从作者们的电泳图分析,发现在活化反应的初期,凝血因子X的二条活化路径是彼此竞争的.