获得性免疫缺陷综合征中医证型与CD4+T细胞主要亚群及其关键转录因子的相关性研究

来源 :河南中医药大学 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:iror163
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目的:  分析获得性免疫缺陷综合征不同中医证型CD4+T细胞亚群Th1、Th2、Th9、Th17、Th22、Tfh、Treg及其相应转录因子T-bet、GATA-3、PU.1、ROR-γt、AHR、Bcl-6、FOXP3的变化特征,探讨中医证型与CD4+T细胞亚群之间的联系,为艾滋病中医微观辨证奠定基础。  方法:  筛选2014年6月至2015年5月期间河南中医药大学第一附属医院艾滋病研究中心门诊HIV/AIDS患者72例,同时选取20例来自体检中心的健康人作为健康对照组。依据国家标准及艾滋病专家组意见对HIV/AIDS患者进行辨证分型。采用流式细胞术(FCM)检测CD4+T细胞亚群 Th1(CD4+IFN-γ+)、Th2(CD4+IL4+)、Th9(CD4+IL9+)、Th17(CD4+IL17+)、Th22(CD4+IL22+)、Tfh(CD4+CXCR5+ICOS+)、Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞的百分比。Real time-PCR技术检测其外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子T-bet、GATA-3、PU.1、ROR-γt、AHR、Bcl-6、FOXP3 mRNA的相对表达量。分析不同证型CD4+T细胞亚群及其转录因子的特点。  结果:  1.中医证型基本情况分布:72例HIV/AIDS患者辨证分为6个证型,其中脾气虚弱证23例,占31.94%,肺脾气虚证9例,占12.50%,脾肾阳虚证3例,占4.17%,气血两虚证10例,占13.89%,湿热内蕴证15例,占20.83%,气阴两虚证12例,占16.67%。由此可见,脾气虚弱证最多见,湿热内蕴证、气阴两虚证和气血两虚证次之,肺脾气虚证和脾肾阳虚证相对少见。  2.不同证型间CD4、CD8及CD4/CD8差异性分析:脾气虚弱证、脾肾阳虚证患者CD4+T细胞百分比明显低于其他证型(P<0.05),湿热内蕴证最高,脾肾阳虚证最低;脾气虚弱证、脾肾阳虚证患者CD8+T细胞百分比明显高于其他证型( P<0.05),脾肾阳虚证最高,湿热内蕴证最低;湿热内蕴证CD4/CD8比值明显高于其他证型(P<0.05),脾肾阳虚证明显低于其他证型(P<0.05)。与健康对照组比较,不同证型HIV/AIDS各组患者CD4+T细胞百分比及CD4/CD8比值明显降低(P<0.05),CD8+T细胞百分比明显升高(P<0.05)。  3.不同证型间Th1、Th2及其相关转录因子T-bet、GATA-3差异性分析:脾气虚弱证、肺脾气虚证、脾肾阳虚证患者Th1细胞百分比明显低于其他三组证型(P<0.05),T-bet表达量脾气虚弱证、脾肾阳虚证患者明显低于其他证型(P<0.05);脾气虚弱证、脾肾阳虚证患者Th2细胞百分比明显高于其他证型(P<0.05),GATA-3表达量脾气虚弱证、肺脾气虚证、脾肾阳虚证患者明显高于其他证型(P<0.05);脾气虚弱证、肺脾气虚证、脾肾阳虚证患者Th1/Th2偏移程度明显高于其他三组证型(P<0.05)。与健康对照组比较,不同证型HIV/AIDS各组患者Th1细胞百分比及T-bet表达明显降低(P<0.05),Th2细胞百分比及GATA-3表达明显升高(P<0.05),Th1/Th2平衡向Th2方向发生偏移。  4.不同证型间Th17、Treg及其相关转录因子ROR-γt、FOXP3差异性分析:脾气虚弱证、肺脾气虚证患者Th17细胞百分比明显低于其他证型(P<0.05),湿热内蕴证患者Th17细胞百分比明显高于其他证型(P<0.05);ROR-γt表达量脾气虚弱证、肺脾气虚证、脾肾阳虚证患者明显低于其他三组证型(P<0.05);湿热内蕴证患者Treg细胞百分比明显低于其他证型(P<0.05);FOXP3表达量湿热内蕴证、气阴两虚证患者明显低于其他证型(P<0.05);脾气虚弱证、肺脾气虚证患者Th17/Treg偏移程度明显高于其他证型(P<0.05),湿热内蕴证患者Th17/Treg偏移程度明显低于其他证型(P<0.05)。与健康对照组比较,除湿热内蕴证外,其他证型HIV/AIDS各组患者Th17细胞百分比及ROR-γt表达明显降低(P<0.05),Treg细胞百分比及FOXP3表达明显升高(P<0.05),Th17/Treg平衡向Treg方向发生偏移。  5.不同证型间Th9及其相关转录因子PU.1差异性分析:湿热内蕴证、气阴两虚证患者Th9细胞百分比明显高于其他证型(P<0.05);PU.1表达量脾气虚弱证、肺脾气虚证患者明显低于其他证型(P<0.05),湿热内蕴证、气阴两虚证患者明显高于其他证型(P<0.05)。与健康对照组比较,不同证型HIV/AIDS各组患者Th9细胞百分比明显升高(P<0.05),PU.1表达量明显升高(P<0.05)。  6.不同证型间Th22及其相关转录因子AHR差异性分析:脾气虚弱证、肺脾气虚证、脾肾阳虚证患者Th22细胞百分比明显高于其他证型(P<0.05);AHR表达量脾气虚弱证、肺脾气虚证、脾肾阳虚证患者明显高于其他证型(P<0.05),气阴两虚证患者明显低于其他证型( P<0.05)。与健康对照组比较,不同证型HIV/AIDS各组患者Th22细胞百分比明显降低(P<0.05),AHR表达量明显降低(P<0.05)。  7.不同证型间 Tfh及其相关转录因子 Bcl-6差异性分析:各证型患者间Tfh细胞百分比差异不显著;Bcl-6表达量脾肾阳虚证患者明显高于湿热内蕴证(P<0.05),其他各组间无显著性差异。与健康对照组比较,不同证型HIV/AIDS各组患者Tfh细胞百分比明显升高(P<0.05),Bcl-6表达量明显升高(P<0.05)。  结论:  1.HIV/AIDS患者证型以虚证居多,实证较少。脾气虚弱证最多见,湿热内蕴证,气阴两虚证和气血两虚证次之,肺脾气虚证和脾肾阳虚证相对少见。这提示气虚是HIV/AIDS患者的主要证素和症状特点,其中尤以脾气虚为多见。  2.Tfh细胞各证型间差异不大,其他细胞亚群(Th1、Th2、Th9、Th17、Th22、Treg)各证型间都呈现出不同程度的差异,其中尤以脾气虚弱证、脾肾阳虚证及湿热内蕴证与其他各组的差异最大。这提示艾滋病中医证型与 CD4+T细胞不同亚群具有一定的相关性,临床上可以通过检测艾滋病患者CD4+T细胞不同亚群的比例辅助进行证型的识别。
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