论文部分内容阅读
目的:本文是研究一种能够载cypate的纳米药物的制备和应用。丝素蛋白是一种性能优异的天然蛋白质,具有良好的生物相容性和生物降解性、无毒、无刺激,易于加工成膜、纤维、水凝胶、纳米球、多孔材料等多种形态,在药物传输领域具有广阔的应用前景;其中,纳米载体以其高的比表面积和表面能、易于扩散、对外界刺激反应快等特点,引起了研究者们的高度关注,制备成的cypate-silk纳米球粒子在肿瘤区域的富集、渗透和滞留,进一步利用cypate的近红外荧光和光热效应等特点,使肿瘤部位组织的温度升高,能够引起肿瘤细胞的死亡,从而达到杀死肿瘤的效果。方法:(1)采用CaCl2-乙醇-水(摩尔比1:2:8)处理蚕丝纤维,透析后制成液体,并以称重法进行定量。(2)通过搅拌法、溶剂透析法制备材料包载cypate-silk的纳米药物,并通过测量纳米粒子粒径、粒径分布(PDI)等指标来评价所制备的纳米药物,最终寻找到合适的条件。利用透射电镜(TEM)观察纳米药物的形态与大小,利用DLS来观查cypate-silk纳米药物的粒径分布,并考察了cypate-silk纳米粒子的体外光热效应。(3)通过MTT法比较不同浓度的cypate-silk纳米药物作用于LoVo的细胞毒性,以及考察cypate-silk纳米药物的光热毒性。(4)通过live-dead染色后观察细胞在不同条件下的存活率,以此来评价纳米药物的作用效果。(5)通过流式细胞仪进一步定量检测细胞存活情况。结果:通过搅拌和透析法制备了cypate-silk的纳米药物,其粒径为(126.5±9.5nm)。cypate在体外近红外光照射下具有明显的光热效应,20 g/ml浓度的cypate-silk纳米药物在5min内能升温40℃以上;不同浓度的cypate-silk纳米药物作用于loVo细胞24 h后细胞存活率在90%以上,说明cypate-silk纳米药物的毒性小、生物相容性好;在808 nm的光照(1.5 W/cm2)下,cypate-silk纳米药物明显增加了对loVo的细胞毒性。结论:本文介绍了以丝素蛋白为载体材料制备了载cypate丝素蛋白纳米药物,该纳米药物具有粒径大小合适、分布均一、毒性低等优点。经过光照处理后的cypate-silk纳米药物能够有效的杀死肿瘤细胞。经过上述研究后发现,cypate-silk纳米药物其本身的细胞毒性较低,具有良好的组织相容性,同时具备了光热效应,故可以作为杀死肿瘤的靶向药物。