自组装MUC1糖肽肿瘤疫苗的设计、合成与应用

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肿瘤是目前世界上最危险的疾病之一,在各种肿瘤治疗方式中,肿瘤免疫治疗是一种相对安全和高效的治疗方式。肿瘤多肽疫苗作为一种治疗性疫苗是一种被广泛关注的肿瘤免疫治疗方式。MUC1糖蛋白在腺上皮肿瘤细胞表面过量表达并发生特异性糖基化改变,对肿瘤的诊断和免疫治疗具有重要意义。MUC1蛋白中的糖肽片段成为了肿瘤多肽疫苗设计的重要靶标。目前针对MUC1糖肽的疫苗研究的主要问题是MUC1糖肽的免疫原性很弱,通常不易产生免疫反应。本论文以MUC1糖肽为抗原进行疫苗设计,针对目前MUC1糖肽疫苗研究中抗原免疫原性弱的问题,提出了自组装MUC1糖肽疫苗的设计策略。通过合成疫苗的自组装过程来达到简化疫苗结构,增大疫苗体系尺寸,形成多价抗原体系以及引入多种疫苗组分以增强疫苗的免疫活性的目的。为了增大疫苗的尺寸并构建多价抗原,我们设计了自组装MUC1糖肽疫苗。我们在MUC1糖肽序列中引入自组装多肽片段,合成了自组装疫苗。该疫苗分子能够组装成为数百纳米的纤维结构且在纤维丝表面负载多价MUC1糖肽抗原。这种疫苗能够刺激免疫系统产生高强度免疫反应而无需另加佐剂。全肽骨架的疫苗分子可在体内降解,副作用小。同时,我们发现在此自组装疫苗中添加T细胞表位后进一步提高了疫苗的免疫应答水平。为了开发适用于MUC1糖肽疫苗的安全佐剂,我们使用壳聚糖阳离子聚合物,通过添加聚阴离子化合物的方法制备了壳聚糖纳米颗粒。壳聚糖/γ-PGA纳米颗粒能够辅助MUC1糖肽疫苗有效地刺激免疫系统并产生针对MUC1糖肽抗原免疫反应。其产生的免疫应答水平能够达到弗氏佐剂的水平,而且毒副作用更小,更加安全。为了合成多价MUC1糖肽抗原并通过主客体相互作用连接不同的疫苗组分,我们以β-环糊精为模板设计了MUC1糖肽-环糊精缀合物。我们优化了叠氮-炔基环加成反应的条件,并通过此反应合成了多种全长MUC1糖肽与环糊精的单价缀合物以及MUC1片段与环糊精的多价缀合物。自组装过程用于MUC1糖肽疫苗设计,能够在疫苗尺寸、多价抗原、疫苗佐剂、疫苗组分连接等方面优化疫苗结构,提高疫苗的免疫活性,是一种有效的MUC1糖肽疫苗设计策略。
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