基于核酸适配体的多菌灵检测方法研究

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植物体和水体中残留的多菌灵通过食物链进入生物体,最终对生物体健康造成威胁,已经引起了社会的广泛关注。现有的检测方法虽然具有一定的灵敏度和精确性,但往往需要昂贵的大型设备,专业的技术人员和较长的检测时间,因此建立快速、高效的检测方法具有重要的现实意义。本研究基于多菌灵特异性适配体和纳米金粒子,通过不同的信号输出方式,探索了三种生物传感器检测水体中的多菌灵,主要研究内容如下:(1)基于核酸适配体的NaC l聚集纳米金比色法检测多菌灵。该比色法的检测限低至2.3 nM,线性检测范围为2.3~800 nM。在加标水样的回收实验中,多菌灵的平均回收率为96.3~111.2%,相对标准偏差为1.5~8.9%。该比色法检测多菌灵简单方便,检测时间短,成本低,检测范围较广。(2)基于核酸适配体的纳米金淬灭罗丹明B荧光法检测多菌灵。该荧光法最低检测限为4.3 nM,可以线性检测4.3~300 nM浓度范围内的多菌灵。在加标水样的回收实验中,多菌灵的平均回收率为100.4~114.8%,相对标准偏差为2.1~6.2%。此方法在NaC l比色法的基础上,引入荧光分子罗丹明B将比色信号转化为荧光信号,希望一定程度的提高灵敏度,但由于仪器的标准偏差较大,灵敏度反而不如NaCl比色法。此外,该方法线性检测范围较小,实验过程略复杂。(3)基于核酸适配体的阳离子聚合物PDDA聚集纳米金比色法检测多菌灵。该生物传感器的检测限为2.2 nM,线性检测范围为2.2~500nM。在加标水样的应用中,多菌灵的回收率达94.9~104.8%,相对标准偏差为3.4~12.6%。PDDA聚集纳米金的比色法具有很好的灵敏度和特异性,同时操作简单,检测时间短,仪器要求低,因此在实际水体中检测多菌灵具有很高的潜力。综合比较三种方法,基于核酸适配体的阳离子聚合物PDDA聚集纳米金比色法是三种方法中检测水体中多菌灵相对较理想的方法。
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