【摘 要】
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目的:心脏钠尿肽家族的心房钠尿肽（ANP）主要参与调节体液的量和血压的稳态,并具有抗缺血/再灌注损伤、抗缺氧、抗炎、抗氧化、抗增殖、抗肥大和抑制Wnt等特性。Wnt信号传导作为一条十分保守的信号通路可控制细胞的生长、分化、凋亡及自我更新,其信号失调往往会导致发育异常和疾病,如肿瘤、神经疾病及骨骼和心血管病变等,但其对ANP分泌的作用尚不甚清楚。因此,本研究的目的是利用离体搏动的大鼠心房灌流模型,观
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目的:心脏钠尿肽家族的心房钠尿肽（ANP）主要参与调节体液的量和血压的稳态,并具有抗缺血/再灌注损伤、抗缺氧、抗炎、抗氧化、抗增殖、抗肥大和抑制Wnt等特性。Wnt信号传导作为一条十分保守的信号通路可控制细胞的生长、分化、凋亡及自我更新,其信号失调往往会导致发育异常和疾病,如肿瘤、神经疾病及骨骼和心血管病变等,但其对ANP分泌的作用尚不甚清楚。因此,本研究的目的是利用离体搏动的大鼠心房灌流模型,观察Wnt激动剂对心房ANP分泌和机械活动的影响,并探讨其作用机制。方法:本研究采用的实验模型为离体搏动的大鼠心房灌流模型,ANP含量的检测选用放射免疫分析,蛋白表达采用蛋白免疫印迹方法进行分析。结果:（1）Wnt的激动剂（Wnt agonist1,Wnta;10μmol/L）明显促进心房ANP的分泌,同时显著增加搏动压（与对照循环比较,P<0.05）;磷脂酶C（PLC）的抑制剂U73122（15μmol/L）不仅完全阻断Wnta促进ANP分泌的作用（与单纯Wnta循环比较,P<0.05）,而且完全消除Wnta增加搏动压的效应,甚至翻转其效应（分别与对照和单纯Wnta循环比较,均P<0.05）。（2）Wnta明显上调蛋白激酶C（PKC）β和γ的表达（与对照组比较,均P<0.05）,而U73122可完全阻断Wnta对PKCβ和PKCγ表达的作用（分别与对照和Wnta组比较,均P<0.05）;PKC的抑制剂Go6983（10μmol/L）不仅完全消除Wnta促进ANP分泌的作用（与单纯Wnta循环比较,P<0.05）,也可完全解除Wnta增加搏动压的效应,甚至呈现翻转趋势（分别与对照和单纯Wnta循环比较,均P<0.05）。（3）Wnta显著增加转化生长因子-β活化蛋白激酶1（TAK1）的表达（与对照组比较,P<0.05）,其作用可被U73122所完全阻断（与对照和Wnta组比较,均P<0.05）,而且Go6983也可显著抑制Wnta对TAK1表达的作用（分别与对照和Wnta组比较,均P<0.05）。（4）Wnta明显上调心房活化转录因子2（ATF2）的表达（与对照组比较,P<0.05）,该作用可被U73122和Go6983所完全消除（与Wnta组比较,P<0.05）,TAK1的抑制剂TI（1μmol/L）也可完全阻断Wnta增加ATF2表达的效应（与Wnta组比较,P<0.05）。（5）Wnta明显上调T细胞因子（TCF）3和4及淋巴增强因子1（LEF1）的表达（分别与对照组比较,均P<0.05）,并显著增加心房ANP的分泌和搏动压（与对照循环比较,均P<0.05）,Wnta对TCF3和TCF4及LEF1表达的作用不仅可被U73122和Go6983所完全阻断（与Wnta组比较,均P<0.05）,而且也可被TI所完全消除（与Wnta组比较,均P<0.05）,同时伴随Wnta对ANP分泌和搏动压作用的完全解除（与单纯Wnta循环比较,均P<0.05）。结论:Wnta主要通过Wnt/Ca2+信号路径激活PLC、PKC及其下游TAK1,从而活化ATF2和TCF3/及TCF4/LEF1,并参与调节离体搏动的大鼠心房ANP的分泌和机械活动。
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