油菜素内酯受体SlBRI1磷酸化位点Ser-1040对番茄耐热性的影响

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番茄是一种广泛种植的喜温蔬菜,但是并不耐高温。在我国南北方的大量番茄种植区域,夏季的高温均不利于番茄的生长,以致形成秋季8-10月份的番茄供应淡季。研究番茄高温响应机制,培育耐高温品种能有效缓解高温危害,延长番茄夏季的生长期。油菜素内酯信号对番茄生长发育的多个方面均有重要影响,油菜素内酯受体SlBRI1的磷酸化位点已经被鉴定,但是单个位点的功能及其对番茄生长的影响尚不清楚。本研究针对番茄SlBRI1激酶激活区的一个重要磷酸化位点-丝氨酸1040(Ser-1040)进行研究,构建了番茄Ser-1040模拟的组成型磷酸化的突变体S1040D与模拟非磷酸化的突变体S1040A的植物表达载体,遗传转化SlBRI1弱突变体cu3-abs1,获得转基因番茄系。以转野生型SlBRI1的转基因材料为对照,检测了SlBRI1的S1040A和S1040D的表达量及BR信号通路变化,并且研究了不同突变体在高温胁迫下的种子萌发、幼苗生长、田间生长和生理特性,主要取得了以下研究结果:1. 本研究对S1040A、S1040D突变体的转基因系进行了SlBRI1蛋白表达量检测,确认了转基因系的蛋白表达。结果发现S1040D的蛋白表达量普遍较S1040A少。2. 本研究对SlBRI1的S1040A、S1040D突变体的转基因系进行了BR信号转导检测,结果表明S1040A与S1040D的突变体转基因系与野生型SlBRI1没有显著差别。3. 田间试验研究了高温胁迫下Ser-1040位点对番茄农艺性状的影响。田间试验中高温胁迫对番茄花器官影响较大,其中花冠与雌蕊显著伸长,S1040D突变体转基因株系受到的促进程度最大,S1040A突变体转基因株系则最小;并且高温胁迫抑制萼片、子房生长、单穗花数以及单株产量降低,其中S1040D突变体转基因株系受到的抑制程度最大,S1040A突变体转基因株系则最小。4. 田间试验中发现S1040转基因系比较耐高温,因此研究了高温胁迫下Ser-1040位点对番茄种子萌发的影响。结果表明,高温胁迫抑制番茄种子萌发,并且随温度增高抑制情况越明显,37℃已完全抑制所有株系番茄种子的萌发。其中S1040D突变体转基因系受到的抑制程度大于对照野生型,而S1040A突变体转基因系则相反,对种子发芽的抑制程度最低。高温抑制番茄幼苗地下部分生长表现尤其明显,但是S1040A突变体转基因系幼苗能够通过脯氨酸的增加来缓解其受到的伤害,从而提高自身抗性。5. 生化试验研究了高温胁迫下Ser-1040位点对氧化还原系统的影响。高温胁迫下植株叶片MDA含量增加,SOD、POD、CAT等抗氧化酶活性均呈现先增高再降低的变化趋势。不同株系变化幅度不同,S1040A突变体转基因株系在高温胁迫下抗氧化酶活性较S1040D突变体转基因株系显著提高,胁迫解除后能够快速恢复,说明S1040A突变体转基因株系能够提高抗氧化酶活性,有效清除高温胁迫下的活性氧,一定程度下缓解高温胁迫所引起的膜质过氧化伤害。6. 高温胁迫下Ser-1040位点对光合作用的影响。高温胁迫下番茄叶绿素含量、净光合速率显著降低,耐热突变体S1040A转基因株系的变化幅度最小,恢复能力最强,说明消除S-1040的磷酸化能通过抑制叶绿素降解,保持较高的净光合速率来缓解高温胁迫带来的伤害。
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