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Monacolin K是某些红曲霉菌株的次级代谢产物,对合成胆固醇的限速酶(HMG-CoA还原酶)有特异性的抑制作用,因此具有降血脂、降血糖、抗肿瘤等作用。本文以红曲霉为生产菌株,以提高Monacolin K产量以及红曲霉生长过程中的趋向性为主要研究目标。 1.实验确定了紫外分光光度计法检测Monacolin K的含量,确定最佳提取溶液为70%乙醇,最佳提取时间为8h,检测波长为236nm。该方法具有准确性高、重现性好、操作方便等优点。 2.通过单因素试验确定了红曲霉发酵生产Monacolin K的最佳碳源、氮源及其最适浓度,结果表明甘油和蛋白胨分别为最佳碳源和氮源,甘油最佳浓度范围为14%~16%,蛋白胨最佳浓度为3.0%。 3.红曲霉与酵母菌的混合培养与非混合培养的试验证明:两种培养条件下酵母菌对红曲霉的菌体量和Monacolin K的生成都有显著的促进作用。但是混合培养中酵母菌对红曲霉产物合成的促进作用优于非混合培养,可能原因是混合培养中酵母菌对红曲霉的作用更为直接。 4.研究分别添加三种诱导剂(酵母、酵母破壁液和酵母滤液)于红曲霉培养基中分别进行液态、固态和膜面培养对红曲霉代谢产物Monacolin K合成的影响。结果表明:液态培养中最佳诱导剂为酵母破壁液、固态培养中为酵母滤液、膜面中为酵母。 5.确定了红曲霉液态培养时破壁液的添加时间和添加量为分别为与红曲霉种子培养液同时接入和2.67%(v/v),此时Monacolin K的产量达61.99mg/L。并且对添加破壁液后红曲霉的形态进行了观察,结果表明酵母破壁液对红曲霉孢子形态具有显著的影响。 6.探讨了不同营养源对红曲霉生长趋向性的影响,结果发现菌体对麦芽汁(提供碳源和氮源)培养基的趋向性好于葡萄糖(提供碳源),最次为水(无碳源和氮源)。通过三组验证实验确定营养物也是红曲霉趋向性生长的必要条件。