电针对肾虚型复合应激模型大鼠免疫功能影响的实验研究 目的:慢性疲劳综合征(Chronic Fatigue Syndrome,简称CFS)由美国疾病控制中心1988年正式命名;CFS 在各国均有发病,近年来其患病率、危害性正在逐年增加,给社会和人群造成巨大的经济损失。 经过多年广泛的研究,仍未发现CFS具有特异性的症状、体征和实验室检查的异常改变。由于其病因和病理生理尚未明了,从而缺乏有效的预防和控制措施,治疗上处于被动的初级处理、试验阶段。中医学历来对CFS有深刻的认识,在临床实践中也正在探索新的有效治疗途径,但大多为个案报道和经验总结,相关机理研究较少,尤其是针刺对CFS的机理研究尚没有报道。 在对中医治疗 CFS“临床有效”、“副作用小”的共识基础上,针灸治疗 CFS 的机理研究也在不断深化。但针刺取穴和配穴临床差别极大,源于对CFS的中医辨证分型研究不很深入,针刺对CFS的基本病理机制及治疗作用的实验研究缺乏,深层机理探讨有待展开。在研究中应注意优化穴位组合,筛选有效手段,以利于最大限度地提高疗效。 本实验从针灸治疗 CFS临床有效这一实践基础出发,根据中医辨证论治原则,选取代表穴组,用复合应激模型大鼠近似模拟肾虚型 CFS状态,通过分析肾虚型复合应激模型大鼠在针刺干预下行为学、免疫学、病毒感染等相关指标的变化情况,揭示针刺治疗CFS的机制和为临床治疗肾虚型 CFS筛选出最佳选穴。方法:Wister 雄性大鼠,体重160-180g,随机分为正常组、模型组、电针组。模型组与电针组大鼠采用冷水游泳加肾上腺皮质激素应用一停药法,建立肾虚型复合应激大鼠模型,电针组在造模的同时进行针刺治疗。取穴为百会、足三里、太溪,共计21天。 通过行为学检测对模型进行判定;用酶联免疫吸附法检测大鼠血清的 IL-1β、IL-6含量;用石蜡切片和应用北航 MIAS 医学图像分析管理系统观察大鼠免疫器官脾脏和胸腺的形态学改变;用PCR方法检测大鼠全血中多重支原体和人疱疹病毒6型(HHV-6)感染的阳性率。结果:1、肾虚模型组动物 Open-Field法行为测定的水平运动时间和垂直运动时间呈减少趋势;鼠尾悬挂不动时间较正常组明显延长;游泳至力竭的时间明显低于正常对照组。说明复合应激所致的肾虚模型组大鼠具有躯体和心理的疲劳。 电针治疗组体重增长速度虽然低于正常对照组,但高于模型组,说明电针能部分抗应激所致的体重增长缓慢。肾虚电针治疗组动物Open-Field 法行为测定的水平运动时间和垂直运动时间呈增加趋势;鼠尾悬挂不动时间较模型组明显缩短;游泳至力竭的时间明显延长。从以上可推断电针可以改善模型大鼠的中枢神经系统的“疲劳”状态和抑郁情绪倾向,有效调<WP=4>中文摘要 3整心理疲劳状态。 2、肾虚模型组大鼠出现血清中细胞因子代谢紊乱:IL-1β、IL-6升高。电针治疗组血清中IL-1β、IL-6均趋于正常。说明电针可以调节肾虚型复合应激模型大鼠血清中细胞因子IL-1β、IL-6水平,起到调整免疫功能,缓解疲劳、低热等症状的作用,从而达到治疗 CFS的目的。 3、肾虚型复合应激模型大鼠在免疫器官形态学上发生了明显的改变:脾脏组织白髓发育不良,脾小体个数较正常组明显减少,且无明显的生发中心,可见散在的成熟淋巴细胞;动脉周围淋巴鞘内淋巴细胞稀疏,中央动脉管腔壁纤维化、动脉腔狭窄、甚至闭塞、散在少量淋巴细胞;边缘带也明显变薄,白髓与红髓分界不清。胸腺的基本结构紊乱,皮质与髓质厚度比例约为 1∶1～2,皮质变薄,淋巴细胞数明显减少,细胞松散,核染色质致密浓缩,核固缩,染色深,皮髓质内细胞数均减少。 电针可以调节机体的免疫功能,使紊乱的免疫系统功能和免疫器官的结构趋于正常,电针组形态学表现为:脾脏组织被膜比较完整,脾小体个数较模型组明显增加,部分脾小体中心坏死,部分脾小体增生,其中心免疫母细胞增生。动脉周围淋巴鞘中央动脉腔较模型组增粗、开放。白髓与红髓分界清楚。胸腺被膜较完整,小叶结构存在,皮质和髓质厚度比例约为 1～2∶1,皮质部成熟淋巴细胞数较正常组略少,较模型组多,核染色质致密浓缩,核固缩。 4、肾虚模型组和正常组比较多重支原体和 HHV-6的阳性感染率较高,说明造模后模型组大鼠免疫功能紊乱,机体抵抗力下降,导致病毒感染机率增加;针刺组和模型组比较多重支原体和HHV-6感染的阳性率下降,说明电针可以调节免疫系统功能,增强抗病能力。结论:1、中医认为由于各种致病原因导致气血阴阳失常及脏腑功能失调是疲劳产生的主要机理。证候是中医诊断治疗疾病的基础,近年来,中医界关于CFS证候的研究一直处于一种仁者见仁,智者见智的状态,而且多仅局限于个案总结,说服力不强。另外由于 CFS证侯组合的复杂性、多变性,很难用少数固定的证类概括全部病例,且随着病情的加重,虚象越来越明显,病情较为复杂,复合证候增多,因此本研究仅通过电针对肾虚型复合应激大鼠免疫系统功能影响的研究从肾虚这一单方面证候进行实验和探讨,以观察肾虚与 CFS、免疫功能的关系,以及电针对其的调整作用。 2、电针可以显著逆转模型大鼠的“躯体疲劳”和“心理疲劳”,通过心身调节改善动物的疲劳状态,具有抗