转基因番茄作为生物反应器的初步探索

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很多“小分子药物”是来自于植物的自然产物,或者是在植物来源分子经过合成加工之后形成的,几千年以来,人们一直以这种方式利用植物来预防和治疗疾病。然而,大量的药用蛋白是从动物或人中获得的,并在微生物或动物生物反应器中进行商业化生产。但就在最近十几年来,植物基因组被改造来生产重组蛋白。相较于其他生物反应器系统,植物可以以农业规模生产重组蛋白,而且可以排除产品被内毒素或以人病原体污染的危险;另一个优点是生产疫苗类重组蛋白时,可以不加工或部分加工后被采用。植物生物反应器为重组蛋白的生产提供了广阔的前景。人类酸性成纤维细胞生长因子(aFGF,FGF-1)是成纤维细胞生长因子超家族成员。来自于三个胚层的多种细胞都可以表达aFGF。aFGF在治疗帕金森综合症、急性脊柱扭曲性损伤、断指中神经功能重建、脑缺血、肾缺血、心肌梗塞、闭塞性脉管炎、视网膜缺血、胃溃疡及难愈合性伤口等多种临床应用方面具有巨大潜力。为了满足对aFGF这种价格昂贵的细胞因子的需求,结合植物生物反应器的优点,本实验就转基因番茄表达aFGF进行了探索。我们构建的双元表达载体带有一个经过改构的人类酸性成纤维细胞生长因子基因(aFGF),载体上的选择标记基因为manA,它使得转化过程中可以使用PMI这种不含抗生素及除草剂的选择系统。我们利用农杆菌介导的转化方法获得了aFGF转基因番茄植物,并且通过Southern杂交、RT-PCR证明了aFGF在宿主基因组中的整合及表达。
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