根据Genbank已发表的猪细小病毒（PPV）NADL-2株的核酸序列，自行设计了一对引物；SDS-蛋白酶K法提取PPV RP DNA作为PCR扩增模板，进行PCR扩增；获得了猪细小病毒VP₂蛋白主要抗原域的核酸片段；将其克隆入pGEM-T^?-easy克隆载体中，经酶切鉴定分析，证实为PPV VP₂蛋白的主要抗原域（命为VP₂Ⅰ）；再将其亚克隆入原核表达载体pET32-α（+），构建成VP₂蛋白主要抗原域原核表达载体pET VP₂Ⅰ。 用已构建的表达猪细小病毒VP₂蛋白主要抗原域的原核表达载体pET VP₂Ⅰ转化大肠杆菌BL21（DE3），挑取阳性克隆培养，IPTG诱导后裂解菌体作SDS-PAGE分析，出现大小约45KD的表达产物即融合蛋白TrxA-VP₂Ⅰ，表达量约30％，经Western-blot验证重组蛋白具有PPV特异的反应原性，通过摸索不同诱导时间、不同诱导所需IPTG浓度优化了VP2蛋白主要抗原域VP₂Ⅰ融合蛋白的表达条件：2×YT培养基30℃培养待菌生长至OD600为0.4-0.6时，用终浓度为0.2mM的IPTG诱导，于37℃振荡培养4-5h。由于表达产量较高，融合蛋白以包涵体的形式存在，超声波裂解菌体分离包涵体并离心、洗涤；分别采用不同浓度的尿素与盐酸胍溶解包涵体，证明6M尿素变性能力较好；分别采用了凝胶层析（FPLC）与螯合亲和层析纯化了经变性处理的融合蛋白，前者蛋白回收率达25.8％；冷冻干燥保存了纯化的重组蛋白备做检测抗原，为检测PPV抗体的乳胶凝集试剂盒与ELISA试剂盒的建立奠定了基础。