烟草野火病颉颃细菌的筛选、鉴定及发酵条件的初步研究

来源 :西北农林科技大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:z19910620
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烟草野火病是由pseudomonas syringae pv.tabaci引起的一种细菌性病害。20世纪80年代以来,该病在云南、贵州、河南、山东、湖北、辽宁和吉林等烟区均有大面积发生,并有逐年加重的趋势,造成了较严重的经济损失。随着化学农药引起的环境污染问题以及人们公认的3R(抗性、残毒、再猖獗)问题的出现,生物防治作为病害综合治理(IPM)的主要措施正愈来愈受到人们的重视,利用自然环境中的拮抗微生物防止植物病原的侵袭,这样可以避免由化学农药引起的环境污染问题以及人们公认的3R问题。本试验通过对烟草根际土壤中的颉颃菌株的分离、鉴定以及发酵条件的优化得到如下的结论:(1)用稀释分离法对陕西泾阳大田烟草根际土壤进行颉颃菌株的分离,共分离到有颉颃作用的菌株127株。经室内平板拮抗作用试验初步筛选,得到颉颃细菌6株。依据颉颃活性测定结果,尤以菌株w-5233的颉颃活性最强,菌株w-5233对烟草野火病菌的抑制率可达85.98%。经初步鉴定,菌株w-5233属于芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌。(2)对菌株w-5233的抑菌谱测定表明:菌株w-5233除了对烟草野火病菌具有极好的颉颃作用之外对供试的11株植物病原真菌也具有颉颃作用。其中对番茄早疫病菌、稻瘟病菌、黄瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、烟草赤星病病菌以及小麦根腐病菌具有较好的颉颃效果。(3)通过温室盆栽试验,发现六株颉颃菌对烟草野火病具有一定的防治效果,且保护效果又均强于治疗效果。其中,w-5233的保护和治疗效果最佳,分别为85.98%和76.95%。用“DMRT”法对防效差异进行显著性测定结果表明:该菌株的保护效果和治疗效果均达极显著水平用防效最佳的颉颃菌株w-5233进行植物促生作用的试验,得出:无论在玻皿实验还是盆栽实验中,该菌株对烟草种子的萌芽、植株根系的生长及株高均无不良影响,表现出明显的促进作用。(4)通过对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)w-5233菌株所用培养基进行了优化,得出:最适宜颉颃菌株生长的培养基配方是:蔗糖0.5%、淀粉0. 18%、大豆粉6%、氯化锰0. 3%、磷酸二氢钾0.15%、磷酸氢二钾0.3%、氯化镁0. 06%、酵母膏0 .03%,硫酸铁0. 02%、碳酸钙0. 01%。通过摇瓶发酵试验得到种子液最佳发酵时间是72h。
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