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目的:富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP )是全血通过离心获得的富含血小板的血浆成分。因其来源于自体血,富含多种生长因子,生长因子具有自然配比,使其得以广泛应用于组织修复与再生的基础研究和临床治疗。骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs )是组织工程领域重要的“种子细胞”。其具有自身增殖能力强、分化范围广,能够修复损伤组织等功能特点,已经大量应用于组织工程研究。近年来,PRP被证明能有效促进BMSCs的增殖及成骨、成脂分化。但是,目前对PRP组织修复作用的认识还较为粗浅,临床应用也较为初步,尚缺乏对不同浓度PRP影响BMSCs增殖和分化的具体认识,也未探索出PRP促进BMSCs增殖和影响分化的最佳浓度,这些问题限制PRP的临床精准使用。方法:本研究阐述了不同浓度 PRP ( 200× 1 09/L, 500× 1 09/L, 800× 1 09/L, 1 000× 1 09/L,1200×109/L, 1500×109/L, 1800×109/L, 2000×109/L, 2500×109/L, 3000×109/L)的制备方法,通过流式细胞术检测了 PRP中血小板特异标记CD41a和CD42b的表达情况,CCK-8法检测了 PRP对BMSCs增殖的影响。借助电镜、油红O染色,ALP染色、Von Kossa染色、RT-PCR法在形态、细胞、分子层面分析了不同浓度PRP对于BMSCs增殖和成骨、成脂分化的影响,绘制了较为详细的作用曲线。结果:在BMSCs增殖方面,随着浓度的升高,在低于1500～1800×109/L时,PRP促进BMSCs增殖呈现浓度依赖的递增特性,在1800×109/L～3000×109/L区间达到平台期,组间无显著性差异。成骨分化方面,随浓度升高,PRP影响成骨分化呈现先升高后降低的特性,峰值出现在1500×109/L左右,1800×109/L以上浓度较1500×109/L下降明显,在成骨诱导剂协同下,浓度在1800×109/L～3000×109/L区间,促成骨作用逐渐回升,并在2500×109/L～3000×109/L再次达到峰值。成脂分化时,0～3000×109/L区间,PRP促进BMSCs向脂肪分化呈现浓度依赖的递增特性,且2000×109/L以下作用效果较弱,2000×109/L～3000×109/L之间作用效果较明显。成脂诱导剂联合作用时,不同浓度间差异更为明显。结论:PRP体外促BMSCs增殖的最优浓度为1800×109/L,促进成骨分化的最优浓度为1500×109/L,浓度低于2000×109/L时促进成脂肪分化作用较弱,大于2000×109/L作用较强。提示骨缺损、骨不连时可以选择促成骨、增殖最佳,促成脂作用较弱的PRP浓度,即1500×109/L;整容领域应用时可选用促增殖、成脂较佳,而促成骨作用较弱的PRP浓度,即3000×109/L。本研究探索了不同浓度PRP对BMSCs增殖和分化的影响,分别获得了促进BMSCs增殖、成骨、成脂分化的优化浓度,进而为临床上不同组织、不同疾病的PRP精准治疗提供理论依据和参考方法。