低分子肝素(low molecular weight heparin, LMWH)与肝素(unfractionated heparin, UFH)相比具有皮下注射吸收好、半衰期长、生物利用度高、同质性好、抗血栓作用强、副反应少、基本不需实验室监测等优势。近年研究证实,LMWH除了公认的抗凝血、抗血栓作用,还具有抗炎、免疫调节、抑制平滑肌细胞增殖、抗肿瘤转移等多种生物学活性和药理作用,近年尤其是LMWH抗炎作用颇受重视。溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)与克罗恩病(Crohn’s diease, CD)同属炎症性肠疾病(Inflammatory bowel disease, IBD),其中UC是一种病因不明的慢性非特异性肠道炎症,在炎症活动期存在明显的血液高凝现象,病变主要位于结肠的黏膜层,且以溃疡为主,多累及直肠和远端结肠,但可向近端扩展,以至遍及整个结肠。UC目前已被世界卫生组织列为现代难治病之一,受到国内外医药工作者的广泛关注,有关其病因、发病机制以及药物的研发已成为研究的热点。目前LMWH主要以注射给药方式用于抗凝血、抗血栓,为充分发挥LMWH的抗炎作用,同时考虑到UC病变部位的不同,本课题分别研制了适用于结肠远端及直肠部位的LMWH直肠栓剂和适用于结肠近端的LMWH口服结肠定位释药胶囊及LMWH复方口服结肠定位释药胶囊,并对LMWH治疗UC的机制进行了探讨。主要研究内容包括以下几方面。1.LWMH直肠栓剂的研制以栓剂外观、融变时限、体外释药为考察指标,经过筛选,选取PEG 6000和PEG 400(7：3)作为栓剂的基质,结果显示该栓剂释药速度缓慢而持久,符合局部用药的要求。根据中国药典规定,对所制得的栓剂分别从外观性状、融变时限、重量差异、含量测定、体外溶出试验五方面进行了质量评价,结果均符合中国药典规定。以肉眼观察,病理切片,MPO活性测定这三方面对LMWH直肠栓剂的药效进行了考察,结果显示LMWH直肠栓剂能够明显改善UC小鼠模型的病理症状,表明LMWH直肠栓剂具有治疗UC的作用。2.LMWH口服结肠定位释药胶囊的研制以颗粒的大小均匀度、硬度为筛选指标,选取糖粉和糊精(3：1)作为辅料。对制得的LMWH口服结肠定位释药胶囊进行质量检查,包括外观检查、装量差异、含量测定、体外溶出试验四个方面,结果均符合中国药典质量标准,表明该制备胶囊的方法可行。采用X射线法来监测该胶囊在胃、肠道内的转运及存在状态,观察其崩解释药特性,结果表明LMWH口服结肠定位释药胶囊具有结肠定位释药的功能。对LMWH口服结肠定位释药胶囊的药效学进行了考察,结果显示LMWH口服结肠定位释药胶囊能够明显改善UC模型中小鼠的病理症状,表明LMWH口服结肠定位释药胶囊具有治疗UC的作用。3.LMMH复方口服结肠定位释药胶囊的研制LMWH具有抗血栓、抗炎作用,低聚木糖具有促进肠道益生菌生长的作用,本研究将LMWH与低聚木糖联用,采用口服结肠定位给药方式,从抗栓、抗炎和改善肠道微生态的角度探讨它们对UC的疗效。通过观察颗粒的大小均匀度、硬度以及颗粒流动性、吸湿性,筛选出最佳处方：淀粉：糊精：低聚术糖=1：1.5：1.5。对制得的LMWH复方口服结肠定位释药胶囊进行了质量检查,包括外观性状、装量差异、含量测定、体外溶出试验四方面,结果均符合中国药典质量标准,表明该制备胶囊的方法可行。从肉眼观察,病理切片,MPO活性测定,肠道细菌的变化这四方面对LMWH复方口服结肠定位释药胶囊的药效进行了考察,结果显示该胶囊能够明显改善UC模型大鼠的病理症状,表明其具有治疗UC的作用。4.LWMH治疗溃疡性结肠炎机制的研究本课题在进行LMWH制剂药效学考察的同时,还进行了其治疗UC的机制研究。采用酶联免疫吸附检测法(ELISA)检测了血浆TNF-α、IL-6,FXa的水平,免疫组化检测了UC小鼠模型肠黏膜组织中Musashi-1的表达水平。结果显示LMWH通过抑制FXa,进而抑制了其下游产物,如炎症因子TNF-α、IL-6的表达的表达,结果还提示LMWH可能通过促进肠道干细胞的增殖和分化起到抗UC作用。对LMWH治疗UC的作用机制研究还有待进一步深入。本研究取得的主要研究成果有：1.制备了LMWH直肠栓剂,并对其进行了质量评价和药效学评价,结果显示该制剂符合中国药典要求,具有治疗UC的作用。2.制备了LMWH口服结肠定位释药胶囊,并对其进行了质量评价和药效学评价,结果显示该制剂符合中国药典要求,具有治疗UC的作用。3.制备了LMWH复方口服结肠定位释药胶囊,并对其进行了质量评价和药效学评价,结果显示该制剂符合药典要求,具有治疗UC的作用。4.研究显示LMWH通过抑制FXa,进而抑制了其下游产物的表达,如炎症因子TNF-α、IL-6的表达,通过提高UC小鼠模型肠黏膜组织中Musashi-1的表达从而促进肠道干细胞的增殖发挥治疗UC作用。