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本试验以间情期母犬的卵母细胞为试验材料,研究了在含不同浓度促黄体素(LH)与促卵泡素(FSH)的培养液中体外培养效果的差异;不同浓度的发情犬血清对卵母细胞体外成熟效果的影响;培养时间的长短对卵母细胞核成熟效果的相关性,探讨了犬卵母细胞体外培养部分环节的影响因素。结果如下:1.LH对犬卵母细胞体外成熟的影响。在基础培养液中分别添加0、2、4、8IU/mL LH,将采集到的COGS随机移入培养液滴中,进行体外培养。结果表明:2IU/mL和4IU/mL LH组的成熟效果均明显高于对照组(P＜0.05),且2IU/mL LH组略高于4IU/mL LH组(P＞0.05)。2.FSH对犬卵母细胞体外成熟的影响。在基础培养液中分别添加0、2、4、8IU/mL FSH,将采集到的COCS随机移入培养液滴中,进行体外培养。结果表明:8IU/mL FSH组的成熟效果极显著高于对照组和2IU/mL FSH组(P＜0.01);略高于4IU/mL FSH组(P＞0.05)。3.FSH与LH协同对犬卵母细胞体外成熟的影响。将FSH和LH的各个实验浓度进行正交组合,基础液设为对照组(A组),成熟培养60h。在各协同添加组中,以FSH和LH浓度均为2IU/mL的成熟效果极显著高于对照组(P＜0.01),成熟率最高;在高浓度(8IU/mL)FSH下继续添加LH的三组培养后的成熟率与对照组比较差异不显著(P＞0.05),并极显著低于其他协同添加组(P＜0.01)。4.EDS(发情犬血清)对犬卵母细胞体外成熟的影响。筛选出的成熟培养效果最佳的FSH与LH浓度配比作为对照组(FSH与LH均为2IU/mL),试验组在对照组基础上分别添加10%和20%EDS,将采集到的COCS随机移入培养液滴中,进行体外培养。结果表明:添加10%EDS的成熟率最高,各组间差异不显著(P＞0.05)。5.培养时间对犬卵母细胞体外成熟的影响。将卵母细胞置于进一步筛选后成熟效果最好的培养液滴即基础液+2IU/mL LH+2IU/mL FSH+10%EDS中培养,分别于第0h、24h、36h、48h、60h和72h时检查卵母细胞成熟情况。结果表明:培养36h时处于GVBD期、60h处于MII期的卵母细胞比率极显著高于其它培养时段(P＜0.01)。本试验证明:间情期犬卵母细胞的体外成熟效果与FSH和LH浓度密切相关,单独添加时,FSH与LH的最佳剂量分别为8IU/mL和2IU/mL,协同添加时,当FSH和LH均为2IU/mL,成熟效果最佳;发情犬血清有助于进一步提高体外成熟效果;培养时间的长短对犬卵母细胞的核成熟效果密切相关,最佳培养时间建议36h～60h为宜。