近年来,由于对膜的化学功能、免疫物质及新药物资源等研究的深入,人们发现多糖在生物体内不仅作为能量资源或结构材料,更重要的是还参与了生命现象中细胞的各种活动,具有多种多样的生物学功能。多糖的生物学功能与其一级结构及高级结构密切相关。本文以资源丰富的双低油菜籽饼粕为研究对象,利用生物大分子研究的最新技术和现代分离分析手段,对菜籽多糖进行分离纯化、理化性质及一级结构的研究。主要研究结果如下: 1.在保证菜籽多酚、菜籽蛋白和菜籽植酸得率的同时,采用水提醇沉法提取分离菜籽多糖。经正交试验得到菜籽粗多糖RSPS的最优化提取工艺条件为:100℃条件下以1:25的料液比浸提菜籽饼粕4小时,此时,RSPS的得率为2.8%。 2.通过离子交换和葡聚糖凝胶二级柱层析纯化方法获得菜籽多糖相对均一的组分RSPS1-3。葡聚糖凝胶柱层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳实验表明RSPS1-3是分子量分布较为均一的糖蛋白缀合物。经测定RSPS1-3中中性糖含量为51.4%、葡萄糖醛酸含量为39.2%、蛋白质含量为4.45%。凝胶渗透色谱(GPC)测定RSPS1-3的平均分子量为2.24×10~5Dal。 3.经紫外光谱、红外光谱扫描也验证了RSPS1-3是含有蛋白的多糖。薄层色谱和气相色谱的结果显示,菜籽多糖RSPS1-3主要由鼠李糖、甘露糖、果糖、半乳糖和葡萄糖组成,其中还含有一种未知糖,六种单糖的摩尔比依次为鼠李糖:未知糖:甘露糖:果糖:半乳糖:葡萄糖=1.0:2.05:2.32:1.34:4.95:2.91。本研究运用两种不同的衍生方法对菜籽多糖RSPS1-3进行气相前的衍生化处理,结果表明各标准单糖经乙酰化后产生了3～4个异构峰,保留时间相差无几,而经三甲基硅烷法衍生后,未见任何异构峰,且保留时间差异明显,这与文献资料记载的乙酰化衍生法不易产生异构峰的说法相反。 4.氨基酸自动分析仪测得菜籽多糖RSPS1-3中的蛋白主要由谷氨酸、赖氨酸、甘氨酸等15种氨基酸组成;β-消除反应表明,RSPS1-3的糖链与蛋白质之间通过O-糖苷键相连。高碘酸氧化反应的结果证实RSPS1-3的糖链中存在较多的1→6糖苷键,而其他糖残基则以1→3糖苷键相连,或以1→2,1→4糖苷键相连。 5.红外图谱解析得知,菜籽多糖RSPS1-3的糖链主要由α-糖苷键连接的吡喃糖组成,而刚果红试验表明,RSPS1-3亦能与刚果红络合发生显色反应,这与文献记载的只有含β-螺旋构型的多糖才能发生刚果红显色反应似乎矛盾,RSPS1-3是否具有螺旋结构还有待进一步证实。