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重楼属(Paris)隶属延龄草科(Tirlliaceae),共有24个种,我国有19个种,主要分布在西南地区。本属植物是重要的中草药,在植物系统发育和化学指纹图谱的研究中都有着重大意义。
matK基因和rbcL基因均为叶绿体基因。matK基因位于trnK基因的内含子中,编码的成熟酶参与RNA转录本中11型内含子的剪切。rbcL基因编码核酮糖1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubiseo,Rbe)的大亚基,目前这两个基因已广泛用于植物系统发育分析。
本文从三方面对重楼属植物进行了研究。
(1)基于matK基因的重楼属几种植物遗传关系的分析。本研究测定了分布于湖南省、云南省和吉林省的七叶一枝花Paris polyphyllavar. chinenis(Franch.) Hara、狭叶重楼P.polyphylla var.stenophyllaFranch.、短梗重楼P.polyphylla var. appendiculata Hara、巴山重楼P.bashanensis Wang et Tang、凌云重楼P.cronquistii(Takht.) H. Li、多叶重楼P.polyphylla var.polyphylla Smith、宽叶重楼P.polyphylla var。stenophylla f.latifolia(Wang et Chang)H.Li、北重楼P.verticillata M。Bieb、滇重楼P.polyphylla var.yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz.、长药隔重楼P.polyphylla var.pseudothibetica H.Li等10种重楼属样品的matK基因序列,比较了该基因的差异,构建了基于matK基因序列的遗传进化树。这10个重楼属植物样品可以划分为4个组群,matK基因序列的结果不支持长药隔重楼、滇重楼、短梗重楼、七叶一枝花成为独立的变种,建议作为多叶重楼的变型处理。在matK基因的序列上,凌云重楼与多叶重楼(及其7个分类群)关系较近,说明这两个种之间确实存在较近的亲缘关系。
(2)基于rbcL属几种植物遗传关系分析。测定了上述10个重要的重楼类群样品的rbcL基因序列,比较了该基因的差异,构建了基于rbcL基因序列的遗传进化树。长药隔重楼、滇重楼、短梗重楼、七叶一枝花、多叶重楼、宽叶重楼、狭叶重楼等7个分类群有很近的亲缘关系。从分子水平上支持了李恒分类系统中把宽叶重楼、狭叶重楼作为多叶重楼的变种,巴山重楼单独分为一支和北重楼分别单独分为一支的观点。同时也说明生境对重楼属植物表型有较大环境饰变作用。基于matK、rbcL基因的重楼属几种植物遗传关系的分析得到的结果基本一致。本研究将为重楼的保护和合理利用提供基本理论依据。
(3)通过高效液相色谱对重楼属几种植物进行化学指纹的分析:重楼属植物,其主要化学成分是甾体皂苷,具有祛痰、抗菌、镇痛、镇静、抗癌和止血等活性,是云南白药、宫血宁等多种中成药和新药的主要原料。HPLC指纹图谱分析可以直观地为重楼属植物的化学成分定性。通过对几种重楼的化学指纹进行比较,结果发现重楼属植物茎叶中也含有有效成分,重楼属植物根中的有效成分的含量比茎叶中多,地理环境对重楼属植物有效成分含量的影响比较大,重楼用药应在固定产地和品种的前提下,才能保证药品质量的一致性。