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发菜(Nostocflagelliforme)是发状念珠藻的简称,隶属于原核生物界(Procaryotae)蓝藻门(Cyanophyta)、蓝藻纲(Cyanophyceae)、段殖体目(Hormogonales)念珠藻科(Nostocaceae)、念珠藻属(Nostoc),主要生长在干旱半干旱的荒漠草原地带,是干旱荒漠区主要生物固氮资源。发菜营养丰富,具有极高的食用价值和经济价值。药理试验结果表明,发菜多糖能阻断病毒对寄主细胞的吸附,阻止病毒在寄主细胞内的复制,对流感病毒、人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等多种具封套的病毒均具有抗病毒作用。
鉴于发菜多糖具有多种药理作用和生理功能。本试验系统研究了发菜多糖的提取分离方法以及清除自由基的性能,并且初步研究了多糖的结构。通过以上研究,以期为综合开发利用发菜多糖提供理论依据。
通过研究得出如下结论:
1.通过正交试验得出,发菜胞外粗多糖的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度95%,培养液浓缩程度为9倍,乙醇加入体积倍数为5倍为;发菜荚膜粗多糖的最佳提取工艺条件为:浸提温度80℃,浸提时间为3h,料水比为1:120。
2.除去蛋白质和小分子物质的发菜胞外多糖和荚膜多糖经DEAE-52离子交换柱层析后,胞外多糖得到一个组分EPS,为酸性糖;荚膜多糖得到三个组分,其中一个为中性糖命名为CPSC,另两种为酸性糖,分别命名为CPSA和CPSB。通过SephadexG-100柱层析和紫外扫描检测,EPS、CPSA和CPSB均为单一多糖。
3.由红外光谱分析可知,EPS为β-多糖,CPSA为α-多糖,CPSB为α-多糖。由薄层色谱和气相色谱分析得出,组成胞外多糖的单糖摩尔比为:D-鼠李糖:L-阿拉伯糖:D-木糖:D-甘露糖:D-葡萄糖:D-半乳糖=7.767:3.851:10.293:8.517:20.554:13.992。组成荚膜多糖的单糖的摩尔比为:D-鼠李糖:L-阿拉伯糖:D-木糖:D-甘露糖:D-葡萄糖:D-半乳糖=6.7459:2.635:7.552:5.445:11.148:9.528。组成CPSB的单糖摩尔比为:D-甘露糖:D-葡萄糖:D-半乳糖=3.566:3.794:5.983。
4.发菜胞外多糖与发菜荚膜多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基都有清除能力,在一定浓度范围内,胞外多糖与荚膜多糖对三种自由基的清除效果与多糖浓度成正相关。胞外多糖对羟自由基具有较强的清除作用,清除率50%时,所需浓度为70μg/mL。胞外多糖清除自由基的效果较强于荚膜多糖。