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目的通过联合检测GPC3、AFP、CD133在原发性肝癌患者血清及组织中的表达情况,并与正常组织对比,结合临床资料,探讨其在原发性肝癌诊断中的价值。方法1采用ELISA方法检测GPC3和CD133、AFP在57例肝癌和74例肝硬化患者血清中的表达水平; 2采用免疫组织化学染色SP法及IPP(Image-Pro Plus)图像分析软件检测、分析57例原发性肝癌组织、癌旁组织(其中肝细胞癌49例,胆管细胞癌8例)及17例正常肝组织(对照组)中GPC3、AFP和CD133的表达,并根据不同临床病理指标进行分组比较。结果(1)ELISA方法检测GPC3蛋白在肝癌、肝炎后肝硬化患者及正常人血清中表达:肝癌患者、肝炎后肝硬化及正常人血清中GPC3蛋白检测水平分别为:212.6±137.5ng/ml、60.9±27.8ng/ml、39.5±18.7ng/ml;肝癌病人血清GPC3蛋白浓度检测水平显著高于正常人水平及肝硬化病人(均P<0.05),肝炎后肝硬化病人GPC3蛋白检测水平高于正常人水平(P<0.05);肝癌患者血清GPC3蛋白阳性率为77.2%,AFP阳性率为63.1%,CD133阳性率为42.9%; GPC3和AFP联合检测肝癌阳性率为84.2%,GPC3和CD133联合检测阳性率为70.2%,AFP和CD133联合检测阳性率为77.2%;GPC3、AFP和CD133三者联合检测阳性率为92.9%。(2)各组织中免疫组织化学染色结果显示:GPC3蛋白在PHC癌组织中呈巢状分布,深染,表达呈棕黄色,主要存在于细胞质和细胞膜;GPC3、AFP及CD133在肝癌组织中表达明显高于癌旁组织(0.158±0.023vs0.137±0.019;0.118±0.022vs0.114±0.012;0.128±0.023vs0.102±0.013,均P<0.05),癌旁组织中三者表达水平同样高于正常肝组织(0.137±0.019vs0.057±0.016;0.114±0.012 vs0.085±0.009;0.102±0.013vs0.087±0.015,均P<0.05);GPC3与肿瘤分化程度、肿瘤数目、HBsAg、临床分期及AFP水平无明显相关性,而与肿瘤大小、病理分级及合并肝硬化有关;CD133与门静脉癌栓,临床分期显著相关,而与肿瘤大小,AFP水平无关;GPC3与CD133在肝癌中表达均高于AFP(P<0.05)。AFP阳性肝癌中GPC3阳性率为88.9%,而在AFP阴性肝癌中GPC3表达阳性率为57.1%。结论GPC3在HPC患者血清和组织中均高表达,它有可能成为临床上一个新的有效的肝癌标记物;GPC3在AFP阴性肝癌中表达阳性率为57.1% ,有可能成为这类肝癌的有效诊断指标;联合AFP、CD133检测有助于提高原发性肝癌的诊断率。