论文部分内容阅读
WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WASP-family verprolinhomologous protein 1,WAVE1)为近年来发现的新型肌动蛋白调节蛋白,在肌动蛋白聚合和细胞骨架重排中发挥重要作用。近年研究发现WAVE1在人类血液系统肿瘤细胞株中高表达。我们前期研究中发现WAVE1在儿童急性白血病患儿骨髓单个核细胞中高表达,并且与白血病病程相关,但其参与白血病致病的机制尚不清楚。已有研究发现了WAVE蛋白家族参与了实体肿瘤细胞的侵袭转移,但WAVE1是否参与与白血病细胞侵袭转移尚不清楚。本研究首先利用包含84个重要肿瘤通路基因的SuperArray PCR基因芯片研究了转染pcDNA3.1-WAVE1质粒后高表达WAVE1的白血病K562细胞系,发现转染后基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、整合素β3(Integrin,beta 3)等与肿瘤细胞侵袭转移的相关基因表达明显上调。提示WAVE1可能参与了肿瘤侵袭转移。接着以表达上调最明显的MMP-2为研究对象发现:转染pcDNA3.1-WAVE1 24h及48h后K562细胞MMP-2 mRNA和蛋白表达水平明显上调,而转染WAVE1 siRNA 24h及48h后K562细胞MMP-2 mRNA及蛋白水平明显下调。说明WAVE1可能参与了MMP-2表达的调控。进一步研究发现WAVE1促进了K562细胞丝裂原激活的的蛋白激酶(MAPK)通路的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的磷酸化,WAVE1可能通过这一途径影响MMP-2的表达。通过免疫荧光技术发现WAVE1与MMP-2在K562细胞的细胞膜上存在共定位。最后利用transwell方法检测了WAVE1表达对K562细胞侵袭能力的影响,发现与对照组K562细胞相比转染pcDNA3.1-WAVE1后细胞侵袭能力增强,而转染WAVE1 siRNA干扰WAVE1表达后K562细胞侵袭能力减弱。综上,本研究证明了WAVE1参与了K562白血病细胞侵袭的过程,其机制可能和调控MMP-2的表达并与MMP-2协同作用促进了白血病细胞的侵袭转移有关。WAVE1可以作为抗白血病细胞侵袭的新靶点。