附红细胞体病(Eperthrozoonsis)是附红细胞体(Eperthrozoon,简称附红体)寄生于红细胞表面、血浆、组织液及脑脊液中,引起贫血、黄疸、发热等的一种人、畜、禽共患的传染性疾病。近几年,国内对猪附红细胞体病的报道日益增多。为明确该病的发病、感染状况,本研究在对发病猪场进行疫情调查、临床症状、剖检病理变化、鲜血压片和血液推片染色诊断方法检查的基础上,建立套氏PCR诊断方法,并对该病建立人工感染动物模型,证实不同动物在附红细胞体的传播过程中发挥着重要作用。本研究包括三个试验:试验一,猪附红细胞体病套氏PCR诊断方法的研究;试验二,猪附红细胞体病动物感染模型的建立;试验三,猪附红细胞体病在多种动物中交叉感染的研究。试验一猪附红细胞体病套氏PCR诊断方法的研究以无菌法采取自然发病的猪附红细胞体病的血液,用阿氏液抗凝后,从血液中分离纯化E.suis,提取DNA。根据GenBank收录的猪附红细胞体16S rRNA基因序列为例,设计两对特异引物,建立了一种快速、准确检测猪附红细胞体的套式PCR方法,凝胶电泳定性,经扩增后得到了一长度为498 bp的特异条带,测序鉴定确为目的片段;结果表明,建立的套氏PCR检测方法具有高度的特异性和敏感性,能够客观的反映附红细胞体病发病情况,可用于附红细胞体病的检测。试验二猪附红细胞体病动物感染小鼠模型的建立用多种诊断方法确定阳性血液样品,分别经腹腔、皮下及肌肉感染小鼠,定期采血,进行常规血涂片染色,并从血液中分离纯化E.suis,提取DNA,进行套式PCR法扩增,凝胶电泳定性,得到目的片段;在整个实验过程中未见感染小鼠明显的临床症状;附红细胞体的感染方式有以下几种:腹腔、皮下及肌肉感染。可以用小鼠建立猪附红细胞体动物感染动物模型,进行抗附红细胞体药物筛选。试验三猪附红细胞体病在多种动物中交叉感染的研究首先将诊断为阳性的猪附红细胞体血液,进行附红细胞体分离纯化,然后将纯化的猪附红细胞体人工感染大鼠、家兔和雏鸡三种实验动物,并用常规的诊断方法及所建立的套氏PCR方法进行检测,证明了猪附红细胞体在大鼠与家兔之间存有交叉感染,并同时说明了猪附红细胞体具有相对的宿主特异性,为防止该病的交叉的感染并造成流行提供了理论基础。