扶正消瘤颗粒含药血清对人卵巢癌细胞系SKOV-3的增殖抑制及凋亡诱导的研究

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目的:观察扶正消瘤颗粒(CM)对人卵巢癌细胞系SKOV-3的增殖抑制和凋亡诱导作用及其与顺铂(DDP)的协同作用。 方法:改良含药血清制备通法,用于体外培养的人卵巢癌细胞系SKOV-3,实验分为空白组(control)、CM组、顺铂组(DDP)和CM+DDP组。采用MTT法检测其量效关系和时效关系,改良TUNEL法、透射电镜和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡的发生及量化结果,利用western blot检测PCNA和细胞生长曲线的描绘来观察CM对细胞增殖的影响,以及western blot检测bcl-2/bax的表达。 结果:MTT tests显示了本方的量效关系和时效关系,在15%浓度的药物血清作用下,CM组在72h后,其抑制率可达41%;DDP组在48h后可达半数抑制率,而CM+DDP组在24h后即可达半数抑制;量效关系上,血清作用48h后,20%CM组的细胞数是10%CM组的细胞数的2倍,20%DDP组的细胞数是10%DDP组的细胞数的8倍,而20%CM+DDP组的细胞数是10%CM+DDP组的细胞数的3倍,是20%的DDP组的细胞数的6倍;TUNEL和透射电镜及FCM均提示了细胞凋亡的发生,CM可见少量凋亡的细胞,CM+DDP组则凋亡细胞与继发性坏死并见;western blot检测含药血清干预后的细胞PCNA表达下降,以CM+DDP更为明显;生长曲线见CM在第5天抑制率达33%,DDP在第4天抑制率达54%,CM+DDP在第2天抑制率达53%;western blot检测CM可下调bcl-2/bax比率,而CM+DDP更为显著,与凋亡呈正相关。 结论:改良的含药血清制备通法适用于非特殊药物组成的中药复方,所得到的血清是有效的;扶正消瘤颗粒含药血清对人卵巢癌细胞系SKOV-3有增殖抑制和诱导凋亡的作用;扶正消瘤颗粒与顺铂的联用在对SKOV-3的增殖抑制和凋亡诱导过程中有协同作用。
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