【摘 要】
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目的:近年来,循环MicroRNA（miRNA）已被证明是用于疾病诊断的有前途的生物标志物。先前的研究已经报道了miRNAs作为各种癌症的诊断和预后生物标志物。前期工作利用高通量miRNAs芯片差异表达技术检测到miR-642在胃癌组织中的表达与癌旁组织相比下调6.4倍（P<0.05）。提示miR-642在胃癌发生中可能发挥抑癌基因的作用。本研究旨在探索miRNA-642作为生物标志物在胃癌血清中
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目的:近年来,循环MicroRNA（miRNA）已被证明是用于疾病诊断的有前途的生物标志物。先前的研究已经报道了miRNAs作为各种癌症的诊断和预后生物标志物。前期工作利用高通量miRNAs芯片差异表达技术检测到miR-642在胃癌组织中的表达与癌旁组织相比下调6.4倍（P<0.05）。提示miR-642在胃癌发生中可能发挥抑癌基因的作用。本研究旨在探索miRNA-642作为生物标志物在胃癌血清中的表达及对胃癌诊断和预后的价值,以及miRNA-642对胃癌细胞增殖和迁移的影响,探索用血清miRNA生物标志物检测胃癌的诊断价值。方法:研究2017年12月至2019年12月于内蒙古医科大学附属人民医院及收集的胃癌患者血清样本378例,健康个体血清样本150例,所有病例均符合胃癌诊断标准。1.我们将所有的样本随机分为训练组（胃癌患者血清78例,健康人血清50例）和验证组（胃癌患者血清300例,健康人血清100例）,采用实时定量荧光PCR（RT-q PCR）检测训练组和验证组胃癌患者血清及健康人血清中miRNA-642表达差异,并分析其表达量在胃癌患者中是否与年龄、性别、分期、预后等临床指标的关联;2.用ROC曲线对378例胃癌患者和150位健康人进行比较,分析miR-642作为胃癌标志物的诊断价值;3.378例胃癌患者miR-642表达量与其临床指标相关联,分析其表达量的高低与患者生存期的关系;4.培养MGC-803、BGC-823、SGC-7901三种胃癌细胞株,将miR-642模拟剂、阴性对照试剂转染至胃癌细胞株,通过Incu Cyte S3长时间动态细胞观察及功能分析系统检测分析miR-642模拟剂、阴性对照试剂组胃癌细胞3天的增殖情况,绘制生长曲线,通过细胞汇合度的变化情况观测miR-642模拟剂、阴性对照试剂组的胃癌细胞增殖差异;培养MGC-803胃癌细胞株,将miR-642模拟剂、阴性对照试剂转染至MGC-803胃癌细胞株,待细胞汇合度达到80%-90%时进行划痕实验,采用分析软件分析两组细胞2天中宽度的变化情况,来分析miRNA-642模拟剂、阴性对照试剂组胃癌细胞迁移的情况。结果:与健康人群相比,训练组和验证组的胃癌患者血清中miR-642的表达明显下调（均P<0.05）。低水平的血清miR-642表达量与肿瘤的TNM分期的Ⅲ+Ⅳ期及是发生远处转移有显著的相关性（P<0.05）。其诊断价值中ROC生存曲线显示,曲线下面积为0.706,具有较好的敏感性和特异性（P<0.05）。血清miR-642表达水平低的胃癌患者总体生存率低。在细胞功能性实验中,与miR-642阴性对照试剂组相比,miR-642模拟剂组细胞的增殖、迁移能力被明显抑制（均P<0.05）。结论:我们的研究结果提示,血清miR-642是胃癌诊断和预后的潜在生物标志物,miR-642表达水平在胃癌的增殖和迁移的进展中发挥重要作用。miR-642具有成为胃癌治疗靶点的潜力。
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